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【 磕康模骸糎TF〗分析乙肝小三阳患者（即HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性）与HBV～DNA的关系。方法：选择2016年9月-2017年9月我院所接收的300例乙肝小三阳患者和50例健康者的血清进行研究，对其血清进行乙肝五项和HBV～DNA的检测。采用时间分辨免疫荧光法（TRFIA）检测乙肝五项，并用聚合酶链式反应法（PCR）检测HBV～DNA，分析比较乙肝小三阳患者（HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性）与HBV～DNA的关系。结果：乙肝小三阳患者（HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性）的检出率是77.1%，HBV～DNA的检出率是62.6%，其中两组数据进行比较（x2=11.1511，P=0.0008），即其差异有显著性。结论：HBeAg 呈阴性情况，可能也有病毒复制的情况，HBV～DNA和HBsAg阳性、HBeAb阳性、HBcAb阳性之间有着较好的相关性，对乙肝小三阳患者来讲其可以有效的指导乙肝疾病的诊断、诊断及临床疗效，也有助于临床治疗方案的制订和预后情况的判断。

【关键词】乙肝小三阳；HBV～DNA；PCR

【中图分类号】R373.2

【文献标志码】A

【文章编号】1005-0019（2018）12-032-01

乙型病毒性肝炎是由于感染乙型肝炎病毒（HBV）引起的，乙型肝炎患者和HBV携带者是本病的主要传染源。感染HBV后，由于受病毒因素、宿主因素、环境因素等影响，会出现不同的结局和临床类型。临床上，对乙型肝炎患者的血清标志物有着多种检测方法，所以急需寻找出一种能够快速灵敏、又具有特异性的检测方法。HBV～DNA是否被感染，有无进行复制，判断标志就是检测HBsAg、HBeAb和HBcAb表达情况，三者全部表现阳性也是乙肝小三阳患者临床诊治、疗效及预后情况判定的重要依据[1]。但因为“窗口期”等问题的存在，通常乙肝病毒即HBV～DNA在机体内的含量多少，是医护人员用来判定病毒等复制与活跃度的重要依据，也是是否具有传染性的直接依据，通过对HBV～DNA的定量检测，判定患者体内乙肝病毒的含量变化。本实验通过研究300例乙肝小三阳病患的血清标志物与HBV～DNA的关系，分析了临床检测HBV～DNA的意义。现将结果报告如下：

1 材料与方

1.1 一般资料 选取的300例研究对象是2016年9月至2017年9月期间，前来我院接受治疗的乙肝小三阳患者。其中男200例，女100例；年龄5至78岁，平均年龄为35.6±5.9岁；其中慢性肝炎患者有172例，肝硬化患者有127例。另外有50例健康者组成的对照组，其中男29例，女21例；年齡6至76岁，平均年龄为36.9±5.8岁。所有研究对象在清晨时空腹抽取静脉血5mL，将血清分离出来，保存在在-20℃的环境中。

1.2 方法

（1）血清标志物的检测

采用时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项，仪器采用的是由美国珀金埃尔默公司所生产的全自动时间分辨荧光分析仪Easycuta，辅以乙型肝炎病毒前S1（PreS1） 抗原检测试剂盒及乙型肝炎病毒e抗原检测试剂盒，用EU标记物的配备专用稀释剂对生物素抗原或EU标记物复溶，具体的加水量及检测步骤，均按仪器说明书上的方法进行。

（2）HBV～DNA检测

采取上海克隆生物高技术有限公司的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒，用PE5700 PCR荧光检测仪检测，辅以荧光探针在体外扩增与检测。结果判断：HBV～DNA值>1×103拷贝/mL为阳性。

1.3 统计学分析 数据资料的分析选择spss18.0进行，计数资料用百分比形式表示为[n（%）]，数据的比较采用x2检验，当P<0.05时，表明差异具有统计学意义。

2 结果

300例乙肝小三阳患者中HBV～DNA的总检出率是62.6%（188/300），HBsAg、HBeAb和HBcAb表现阳性（小三阳）的有145例，占比48.3%，阴性有74例，占比24.7%。在HBV～DNA呈阳性的188人中，HBsAg、HBeAb和HBcAb表现阳性的为77.1%（145/188），在HBV～DNA呈阴性的112人中，HBsAg、HBeAb和HBcAb阴性的检出率为66.1%（74/112），HBsAg、HBeAb和HBcAb与HBV～DNA的检出率不一致，将两组数据进行比较（x2=11.1511，P=0.0008），即其差异有显著性。

3 讨论

乙型肝炎诊断指标最常用的是血清标志物HBV～DNA的检测数据，它能够反映出乙肝病毒在机体内免疫反应的情况，但不能够直接将机体内HBV～DNA复制情况反映出来。临床上HBV～DNA血清标志物具有复杂性，根据检测结果难以准确判断HBV～DNA有无感染及其复制情况。时间分辨免疫荧光法检测通常需要病原体在1015～1017个之间，才能将阳性检测出来，但如果在感染后的“窗口期”，通常有假阴性结果出现。PCR依靠荧光定量的方法，将被感染后的病原体其发病时间、数量及病情状况，两者之间建立了关系[2]。

研究乙肝小三阳血清标志物与HBV～DNA两者之间的相关性，对乙型肝炎在临床上的诊断、治疗效果及预后情况有着极其重要的意义。在本实验中，通过采取TRFIA和PCR两种手段，对300例乙肝小三阳患者HBsAg、HBeAb和HBcAb与HBV～DNA表达情况进行检测。结果表明，乙肝小三阳患者中HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性的检出率是77.1%，HBV～DNA的检出率是62.6%。大多认为若HBeAg呈阳性，HBV～DNA其复制一般呈积极活跃态。这项实验的结果说明，即使HBeAg呈阴性也不能表说明HBV～DNA完全终止其复制或血清中的病毒消失，该结论也与以往的研究结果一致[3]。HBV～DNA的检出率与HBsAg、HBeAb和HBcAb的检出率不一样，其原因可能是HBV～DNA与HBsAg、HBeAb和HBcAb在检测中，其表达的含义没有完全一致。在临床上，以往的观念认为，抗病毒治疗取得疗效的依据就是，慢性乙型肝炎病人HBeAg呈现阴性后，传染性变弱且病情也得以好转。本实验中，在HBeAg呈阴性的患者中，利用信号敏感的DNA扩增，血清中大约可以检测出40%左右的病毒在进行复制。在HBeAg呈阴性的乙肝小三阳患者面前，HBV～DNA是否存在复制情况，可作为疾病发展与预后情况的重要指标，判断出抗病毒的效果[4]。

在本实验中，HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性表达情况和HBV～DNA相关性极高，表明HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性和HBV～DNA其复制情况是一致的，但其阳性的检出率是77.1%，HBV～DNA的检出率是62.6%，二者的检出率有显著性差异，这也说明，在临床的判断上，乙肝病毒其复制情况与其在机体内的活跃程度，不能仅仅只依靠HBsAg、HBeAb和HBcAb阴阳性情况，正确的方法是对HBV-DNA采用定量检测的荧光PCR方法[5]。

血清标志物中HBV～DNA含量的多少是病毒是否继续复制最直接最重要的标志，也是判断感染程度的有效方法，荧光PCR方法可以在DNA程度上，识别在体内的潜伏情况与活跃情况，故此可认定为HBV～DNA有否感染的诊断标准。血清学标志物在此基础上，对于乙肝小三阳患者，通过荧光PCR方法对HBV～DNA动态观测其数量，可以有效的指导乙肝疾病的诊断、诊断及临床疗效，也有助于临床治疗方案的制订和预后情况的判断。

参考文献

[1] 张晓琍，王金龙，林光华，等. 免疫人群乙肝抗体阳性率调查及 腋魏诵目固寮觳夥椒ㄌ教郑跩]. 中国人兽共患病学报，2015，31（03）：289-292.

[2] 邵咏，吕惠娟，邢志广. 乙肝HBeAg、前S1-抗原与HBV-DNA相关性研究[J]. 现代预防医学，2015，42（11）：2069-2071.

[3] 陈仁，廖金瑶，罗晓丹，等. 慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV-DNA相关性研究[J]. 中华疾病控制杂志，2016，20（08）：856-859.

[4] 慎强，董飞波，洪玲珍，等. HBV基因变异对荧光定量PCR系统检测HBV-DNA准确性的影响[J]. 中华医院感染学杂志，2017，27（03）：521-524.

[5] 王斌，黄汉菊. 乙肝病毒血清标志物与HBV DNA载量及肝功能指标的关联性[J]. 华中科技大学学报（医学版），2017，46（02）：214-219.