体内外受精及玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响
2018-10-24邓星段超群黎兴盛袁照清李清刘珍韩艳
邓星,段超群,黎兴盛,袁照清,李清,刘珍,韩艳
(江西省宜春市妇幼保健院辅助生殖科,宜春 336000)
自1978年世界上首例“试管婴儿”路易斯.布朗在英国诞生以来,人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)发展迅速,迄今为止,全世界已经有大约500万例试管婴儿出生[1]。人类ART的成功依赖临床和胚胎实验室的紧密配合,其中实验室质量控制的好坏直接影响到配子的结合和受精卵的发育,进而影响到体外受精-胚胎移植(in-vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的成功率[2],我国人类体外受精胚胎移植实验室操作专家共识(2016版)规定新装修胚胎培养室启用前需要用鼠胚试验(mouse embryo assay,MEA),要求囊胚形成率在75%-80%为合格[3],鼠胚试验合格后才能投入使用。此外,玻璃化冷冻技术因其简单快速有效,并且在复苏率和囊胚孵出率等方面均优于传统程序冷冻技术而被广泛应用。玻璃化冷冻技术提高了每次促排卵/取卵周期的累计妊娠率[4]。本研究拟分别对体内、体外完成受精过程的昆明小白鼠受精卵体外培养至第5d,观察其卵裂率、囊胚率;并对囊胚进行玻璃化冷冻及继续培养,比较囊胚冷冻与否孵出率的差异,以对我院新建胚胎培养室的环境和培养体系进行检测,为本单位顺利开展人类胚胎体外培养提供可靠的实验依据和质量控制保证。
1 材料与方法
1.1 材料 选择湖南斯莱克景达实验动物公司的6-8周龄昆明白雌鼠;选择年龄尽可能大的雄鼠(10周)。光照制度:或者12h黑暗,12h光照。室内温度为20-26℃。雄鼠单笼饲养,雌鼠集中饲养,保证饲养密度不低于100cm2/只,自由饮水采食,饲料为小鼠繁殖料。……
