王靖思 吴洁 孙桂芝��张秋云��刘玉琴 陈兰羽 朱宏伟

摘要 目的：观察桃红芪术软肝煎抗大鼠肝纤维化的作用及对TGF-β/Smad信号通路的影响。方法：选取105只Wistar大鼠，随机分为空白组、模型组、对照药物组（秋水仙碱组、扶正化瘀胶囊组）、桃红芪术软肝煎组（桃红芪术低剂量组、中剂量组、高剂量组）。除空白组外，分3、6、9周3个时间点采用50%CCl41mL/kg橄榄油溶液腹腔注射进行肝纤维化模型制作，同时进行HE染色和Masson染色观察肝纤维化的病理表现；并采用免疫组织化学法检测肝脏组织的E-Cadherin、Vimentin、转化生长因子（TGF）-β1、Smad2蛋白表达；RT-PCR方法检测肝脏组织的E-Cadherin、Vimentin、TGF-β1、Smad2的mRNA表达。结果：肝纤维化病理结果显示，随着造模、给药时间的延长，各给药组均能明显阻断模型大鼠肝组织纤维化进展；与模型组比较，第9周时桃红芪术高剂量组作用最明显。免疫组织化学结果显示，与模型组比较，用药各组从第3周至第9周，E-cadherin表达均较模型组表达明显增加（P<0.05），用药各组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与模型组比较，用药各组TGF-β1表达明显减弱，差异有统计学意义（P<0.05），用药各组组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。RT-PCR结果显示，与空白组比较，模型组Smad2mRNA表达量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），桃红芪术低剂量组VimentinmRNA、Smad2mRNA表达量明显下降，差异有统计学意义（P<0.05），桃红芪术软肝煎中剂量组Smad2mRNA表达下降，差异有统计学意义（P<0.05）；扶正化瘀胶囊组TGF-β1mRNA、VimentinmRNA表达量均较模型组下降，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：桃红芪术软肝煎可持续通过TGF-β/Smad信号通路调节上皮间质转化，治疗肝纤维化。

关键词 孙桂芝；桃红芪术软肝煎；肝纤维化；肝硬化；肝纤维化防治；转化生长因子-β/Smad信號通路；上皮-间充质细胞转化；转化生长因子-β1

AbstractObjective：ToobserveeffectsofTaohongQizhuRuanganDecoctionontreatingliverfibrosisofrats，andeffectsonTGF-β/Smadsignalpathway.Methods：Atotalof105Wistarratswererandomlydividedintoblankgroup，modelgroup，controlgroup（colchicineandFuzhengHuayuCapsulegroup），TaohongQizhuRuanganDecoctiongroup（lowdosegroup，middledosegroup，highdosegroup）.Exceptblankgroup，theliverfibrosismodelwasestablishedbytheintraperitonealinjectionof50%CCl41mL/kgofoliveoilsolutionat3，6，9week.Atthesametime，HEstainingandMassonstainingwereusedtoobservethepathologicalexpressionsofliverfibrosis.TheexpressionsofE-Cadherin，Vimentin，TGF-β1andSmad2inlivertissuesweredetectedbyimmunohistochemistry.ThemRNAexpressionsofE-Cadherin，Vimentin，TGF-β1andSmad2inlivertissuesweredetectedbyRT-PCR.Results：Thepathologicalresultsofliverfibrosisshowedthatwiththeprolongationofmodelingandadministrationtime，eachdrug-administeredgroupcouldsignificantlyblocktheprogressionofhepaticfibrosisinmodelrats.Andcomparedwithmodelgroup，effectofhighdoseTaohongQizhuRuanganDecoctiongroupwasmostobvious.Immunohistochemical：From3weekto9week，comparedwithmodelgroup，E-cadherinexpressionwassignificantlyincreasedthanothergroups（P<0.05），andtherewerenodifferencesbetweengroups（P>0.05）；comparedwithmodelgroup，TGF-βexpressiondecreasedsignificantlyinotherdruggroups（P<0.05），andtherewerenodifferencesbetweengroups（P>0.05）.RT-PCR：Comparedwiththeblankgroup，Smad2mRNAexpressioninmodelgroupsignificantlyincreased（P<0.05）.VimentinmRNAandSmad2mRNAexpressionoflowdosegroupofTaohongQizhuRuanganDecoctionsignificantlydecreased（P<0.05）.Smad2mRNAexpressionofmiddledosegroupofTaohongQizhuRuanganDecoctiondecreased（P<0.05）；TGF-βmRNA，VimentinmRNAexpressionofFuzhengHuayuCapsulegroupdecreasedcomparedwiththemodelgroup（P<0.05）.Conclusion：TaohongQizhuRuanganDecoctioncanregulateepithelial-mesenchymaltransitionthroughTGF-β/Smadsignalingpathwaytotreatliverfibrosis.

KeyWordsSunGuizhi；TaohongQizhuRuanganDecoction；Hepaticfibrosis；Livercirrhosis；Preventionandtreatmentofhepaticfibrosis；TGF-βsignalpathway；Epithelial-mesenchymaltransition；TGF-β1

中图分类号：R289.5；R575.21文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2018.06.047

慢性病毒性肝炎是肝纤维化的主要原因，在肝硬化的形成过程中，肝纤维化是慢性病毒性肝炎向肝硬化发展的不可避免的阶段[1]，肝纤维化及其并发症给社会带来巨大健康负担，由于缺乏有效的治疗方法，慢性肝脏疾病困扰着世界上数百万人[2]。……