岳彩芳 付冰冰 骆 鹏

(佳木斯大学附属第一医院，佳木斯154002)

结缔组织引起的间质性肺疾病称为结缔组织病相关性疾病(Connective tissue disease interstitial lung disease，CTD-ILD)，主要的病理过程为炎性细胞的弥漫性浸润，肌成纤维细胞和成纤维细胞及一些细胞外的基质聚集在肺间质，并发生大量沉积，导致肺泡及毛细血管损伤，间质组织损伤和修复反复交替，最终引起肺结构发生重塑而导致肺的纤维化[1,2]。近些年来，虽然对该病的认识有一定的提高，但间质性肺病仍是难治的一类疾病，且无有效的治疗方法[3]。结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)、转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)等多种促进纤维化的因子在纤维变性过程中发挥作用，可增加成纤维细胞的增殖和分化，诱导其胞外机制合成增多，TGF-β1也被认为是在细胞和组织纤维化过程促纤维化最关键的细胞因子[4,5]。在人体的各个系统有TGF-βs超家族的分布，TGF-β受体Ⅰ(TGF-β receptor Ⅰ，TGFBR1)是TGF-β1/SMADs信号通路的一个重要环节，有研究发现，TGFBR1的敲除可阻断TGF-β1/SMADs信号通路，同样有抗纤维化的作用[6]。研究TGFBR1在肺纤维化中的作用及调控机制，将为CTD-ILD的治疗开辟一条新思路。因此，本研究首先检测TGFBR1在CTD-ILD肺组织的表达，用TGF-β1刺激MRC-5细胞，检测抑制TGFBR1表达对细胞活力、Ⅰ型胶原、CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-Cad)表达的影响，并研究可能的分子机制。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1试剂和仪器 胎牛血清购自美国Gibco；DMEM培养基、LipofectamineTM2000转染试剂盒均购自美国Invitrogen公司；二喹啉甲酸(Bicinchoninic acid，BCA)试剂盒、CCK8试剂盒均购自碧云天生物技术研究所；TGFBR1、Ⅰ型胶原、CTGF、E-Cad、α-SMA、β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc、GAPDH抗体均购自美国ABCam公司；酶标仪购自美国Bio-Tek公司。……