王文刚 王 静 杜建峰 张晓璐 卜秀梅

(沈阳医学院附属中心医院，沈阳110024)

缺血性心脏病是一种死亡率较高的疾病，严重危害人类的健康，给患者以及家庭、社会带来沉重的经济负担，通常采用溶栓等手段，迅速恢复患者冠动脉血液的循环流动是临床治疗缺血性心脏病的关键[1，2]。研究发现，血流重新灌流缺血心肌组织后会使心脏产生新的损伤，降低心功能、心律失常、心肌顿抑等继发性损伤，称为缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury,IRI)[3]。既往研究表明，心肌IRI与细胞增殖、凋亡以及氧化损伤、心肌线粒体能量代谢等有关[4-6]。探明心肌IRI的发生发展的机制以及如何进行有效的防范措施是心血管领域的研究重点。细胞因子信号转导抑制因子3(Suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)是SOCS家族的成员之一。研究表明，敲除小鼠SOCS3对心肌梗死小鼠左心室功能具有显著影响，提示SOCS3在心脏功能损伤过程中发挥作用[7]。为了探究SOCS3基因在缺氧复氧损伤心肌细胞中的作用，本研究通过小分子干扰RNA靶向沉默SOCS3，采用脂质体转染心肌细胞H9C2，进行缺氧复氧处理[8，9]，观察其表达量降低在保护心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用，为后续在体探究SOCS3在心肌IRI中的作用机制提供理论基础。

1 材料与方法

1.1材料 大鼠心肌细胞系H9C2由本实验室保存，最初购买于中科院上海细胞库；胎牛血清、青链霉素、Opti-MEM培养基购自美国Gibco公司；DMEM培养基购自美国Hyclone公司；磷酸盐缓冲液(PBS)购自南京生兴公司；Lipofectamine 2000购自美国Invitrogen公司；siRNA NC或siRNA SOCS3、细胞计数法检测试剂盒(Cell Counting Kit-8，CCK-8)购自广州锐博；乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂盒、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒、丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)检测试剂盒购自南京建成有限公司；……