胡 敏 李海龙 符才波 陈 瑜 陈 军

(海南医学院第一附属医院血液内科，海口570102)

淋巴母细胞性淋巴瘤(Lymphoblastic lympho-ma，LBL)是一种少见的具有高度侵袭性的恶性淋巴瘤，常见于儿童和青少年，是儿童和青少年中第二常见的非霍奇金淋巴瘤(Non-hodgkin lymphoma,NHL)亚型[1]。90%的LBL都为T细胞淋巴母细胞性淋巴瘤(T cell lymphoblastic lymphoma，T-LBL)[2]。T-LBL严重威胁着人们的身体健康。加深对T-LBL的研究对人类抗癌事业具有重要意义。大量研究表明恶性淋巴瘤中存在许多表达异常的小RNAs(microRNAs,miRs)[3,4]。这些microRNAs在淋巴瘤中具有重要的调控作用[5-7]。据报道miR-214在骨髓瘤、黑色素瘤及神经胶质瘤等多种癌症中，通过靶向下游基因调控癌细胞增殖、凋亡、血管新生，侵袭及转移等，具有成为多种癌症治疗靶点的潜能[8,9]。有数据表明miR-214在T-LBL中高表达，miR-214过表达可作为T-LBL诊断和预后的生物标记分子[10]。但miR-214在T-LBL中的具体功能的报道还十分罕见，还有待进一步研究。本研究主要目的是探索miR-214对T-LBL细胞Jurkat增殖、凋亡和侵袭的调控作用及其分子机制。

1 材料与方法

1.1细胞及主要试剂 T细胞淋巴母细胞性淋巴瘤细胞系Jurkat来源于美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection,ATCC)。RPMI1640培养基，胎牛血清及转染试剂TurboFect Transfection Regent购自赛默飞世尔科技公司。RNA提取试剂盒RNAiso Plus reagent和SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒购自大连TaKaRa公司。荧光素酶报告载体pGL3来源于Promega公司。CCK-8试剂盒来源于日本同仁化学公司。细胞凋亡检测试剂盒Annexin V Apoptosis Detection Kit，Transwell小室及人工基底膜来源于美国BD公司。Jurkat细胞于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中置于37℃，5%CO2的恒温培养箱中培养。Jurkat细胞分为4组：Jurkat(对照组)；miR-214 inhibitor组；sh-AIFM2组；miR-214 inhibitor+sh-AIFM2组。

1.2方法

1.2.1实时定量PCR(Quantitative real-time reverse transcription PCR,qRT-PCR) 按照试剂盒说明书提取Jurkat细胞中的总RNA，并反转录成cDNA，根据SYBR Premix Ex TaqTM说明书进行qRT-PCR。……