徐 哲 刘 健 沈少灵 偏丽丽 黄晓峰 林 周 修冰水

(安徽医科大学，合肥230000)

肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是比较常见的恶性肿瘤，其高发病率和高致死率一直是人类难以解决的问题之一，在中国每年有超过三十万人死于HCC，其致死率在肿瘤相关死亡病例中位于第二位，仅次于肺癌，严重危害了人类的生活质量和生命健康[1]。肝癌的发病机制复杂多样，其具体分子机制尚不清楚[2]。多项研究表明炎症和RNA病毒(如HCV)感染是肝癌发病的关键因素[3,4]。炎性细胞因子TNF-α在体内外均可直接杀伤肿瘤细胞。另有研究显示自分泌的IL-6会促进恶性肿瘤细胞生长[5-8]。现代医学主要采用手术、放疗、化疗、血管介入治疗等方法，但疗效并不理想，年生存率仅8%～10%[9，10]。因此研究其发生发展的分子机制，寻求一种新的治疗方式有着深远的意义。

Mindbomb E3 ubiquitin protein ligase 2(MIB2)是Notch配体Delta的E3泛素连接酶[11-13]。近年来越来越多证据证明，Notch 信号通路与肿瘤的发生发展关系密切[14-18]。而MIB2在肿瘤中的作用尚不清楚[19]。本研究通过建立过表达MIB2稳定株，以TNF-α和SEV作用于肝癌细胞，采用软琼脂克隆形成、免疫印迹法及ELISA等方法检测MIB2对HepG2细胞的影响，并探讨其可能机制。运用过表达MIB2稳定株及瞬时敲低MIB2探究对炎症因子IL-6所产生的影响，从而为肝癌的后期治疗提供新的抗肿瘤药物靶点，进而为临床应用提供更多的理论依据，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1主要试剂 胎牛血清购自美国HyClone公司；RIPA裂解液及蛋白定量试剂盒购自北京天根生物公司；LipofectamineTM2000转染试剂盒购自美国Gibco公司；LipofectamineTMRNA iMaX Reagent敲低试剂盒和Hygromycin购自美国Invitrogen公司；……