马 骏 ，童 奇 ，高良弼 ，朱 川 ，江志强

（1.长兴县公安司法鉴定中心，浙江 长兴 313100；2.安吉县公安司法鉴定中心，浙江 安吉 313300）

法医DNA分析技术在刑事司法实践中的作用日益凸显。大多数性侵案件中，常常遇到混合斑的DNA检验，如何从女性阴道分泌液与男性精液组成的混合斑中获得精子细胞是检验鉴定的关键，而精子的个体来源鉴定又是案件侦破和诉讼的关键。一般此类混合斑的检材载体类型较多，采用常规的差异裂解法[1]对精子细胞进行分离，实验时间长，步骤繁琐，特别是在女性阴道上皮细胞大量存在而精子细胞较少时，很难获得完整、单一的精子细胞DNA分型，有时即使获得了分型结果，也多为混合分型[2]。而在实践中面对大量检材时，常要求在短时间内进行精子细胞的提取，但存在消耗时长和提取效率之间的不平衡。基于此，笔者运用尼龙膜套管分离技术，建立一种新型的混合斑中精子细胞分离的方法，以有效解决上述难题。

1 材料与方法

1.1 材料

40份男女性混合斑检材来源于长兴县公安局所承办的性侵案件，其中阴道拭子26份、内裤8份、床单3份、卫生纸2份、卫生棉1份。

1.2 主要试剂和仪器

人精液PSA检测金标试剂条（德国MERCK公司），硅膜试剂盒（Forensic DNA Extraction Kit for Soft Tissues，加拿大 Pulse 公司），AmpFℓSTR®Identifiler®Plus PCR扩增试剂盒（美国AB公司）。

尼龙膜套管（加拿大Pulse公司），9700型PCR仪、3500xL基因分析仪（美国AB公司），5355型恒温混匀仪（德国Eppendorf公司）。

1.3 精子细胞分离方法

依据GA 766—2008人精液PSA检测金标试剂条法[3]对40份检材（1～40号）进行检验，结果均呈阳性，其中21、29号（阴道外口拭子）和36号（现场床单）检材为弱阳性。……