白植宽，高晓慧，冯 涛

0 引言

急性肺损伤(Acute lung injury，ALI)是一种以肺泡毛细血管膜受损为特征的异质性疾病，由于通透性增加而引起肺水肿增加，并可直接或间接发生肺部炎症[1-2]。ALI最常见的直接病因是实质性肺部感染(即肺炎)或出血，而间接病因通常是全身性损伤，如败血症、创伤或急性肾损伤[2-3]。然而，ALI的具体发病机制尚未完全阐明，目前缺乏有效的治疗手段，研究显示，NADPH氧化酶(NOXs)激活产生的活性氧(ROS)在ALI的发病过程中起着重要的作用[2,4]。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)可将NADP+还原成NADPH，是调节细胞中氧化还原平衡的关键酶[5]，其不仅提供了NADPH氧化酶的还原当量，还减少了ROS。在细胞产生ROS的酶体系中，研究最多的是NOX2。NOX2主要存在于嗜中性粒细胞等吞噬细胞中，在气道上皮细胞(AECs)也有表达[4,6]。然而，关于ALI期间G6PD对AECs中NOX2-衍生的ROS作用的研究还较少。由于ROS在ALI过程中起重要作用，我们推测G6PD活性可能通过NOX2调节AECs中ROS的通量发挥。

脱氢异雄酮(Dehydroepiandrosterone，DHEA)是一种G6PD抑制剂，研究证实，DHEA及其代谢产物具有抗炎、抗增殖和免疫调节活性[7-8]。因此，我们研究DHEA对LPS诱导的小鼠模型中G6PD活性、NOX2表达、ROS和AEC中酶抗氧化剂的作用。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂与仪器 LPS、DHEA(美国Sigma公司)；RNeasy微型试剂盒(德国Qiagen公司)；逆转录试剂、Taqman Universal Mastermix、7500实时PCR系统(美国Applied Biosystems公司)；蛋白定量试剂盒、苏木素-伊红(HE)染色剂、DCFH-DA检测试剂盒(南京建成生物)；多功能酶标仪(美国Bio-Rad公司)；流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)；多模式微板荧光分光光度计(BMG LabTech)。

1.1.2 实验动物 实验中使用在无特定病原体条件下饲养的雄性Balb/c小鼠(鼠龄10～12周，体重25～30 g)，由温州医科大学药学院动物实验中心提供。……