申茂磊，王勤章，郑丽英，钱 成，李 朋，钱 彪

泌尿系结石是泌尿外科最常见的疾病之一［1－3］，由多种因素共同作用所致［4］，纳米细菌（nanobacteria，NB）感染被认为是导致结石形成的主要原因之一［5］，其在肾结石患者的血液、尿液和结石中的阳性检出率均在 90%以上［6－8］。有研究者通过检测过氧化氢酶等损伤指标发现NB可以造成与其共同培养的HK－2细胞损伤，又通过观察HK－2细胞与COM晶体的黏附情况发现被NB损伤细胞的晶体黏附性明显增加［9］。然而由于NB的自我矿化特性，以至于众多的抗生素都对其无效，但是四环素能沉积在纳米细菌钙化的外壳上并穿透外壳发挥抗菌作用［10］，是为数不多的能在生理浓度下杀灭NB的抗菌药物之一。有研究者通过口服四环素片治疗NB所致的Ⅲ型前列腺炎，发现83.3%的患者症状得到改善，表明四环素可能通过抗NB治疗慢性前列腺炎［11］。但是四环素能否通过抗NB治疗影响HK－2损伤及结晶滞留，从而达到预防以及治疗NB所致肾结石的目的，不得而知。该研究首先用临床确诊肾结石且未应用药物或手术治疗患者的尿液培养NB，然后通过对NB、四环素等与HK－2细胞共培养，应用电镜和共聚焦显微镜观察HK－2细胞的损伤以及晶体滞留情况，探讨四环素抗NB治疗对HK－2损伤及结晶滞留的影响，以期为泌尿系结石的预防和治疗提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 实验材料 HK－2细胞（购自武汉大学保藏中心），DMEM培养基，1640培养基，胎牛血清，HEPES缓冲液，四环素，细胞孵育箱，透射电子显微镜，激光扫描共聚焦显微镜。……