韩玉生，李东东，侯志涛，朴成玉，周忠光

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种临床常见自身免疫性疾病，主要由于炎症引起关节滑膜、软骨和骨质破坏，近期研究发现RA的发生发展与Th17和Treg细胞密切相关［1］。丹溪痛风胶囊组方来源于《丹溪心法》中所载的上中下痛风方，现代临床上应用于类风湿性关节炎的治疗，取得了良好治疗效果［2］。该研究在2015年8月—12月进行，选取30只SD大鼠，通过CIA大鼠模型，观察丹溪痛风胶囊对脾组织淋巴细胞中RORγt和Foxp3蛋白表达的影响，为临床应用开发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 30只雄性清洁级SD大鼠，体质量（250±20）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK鲁20140001。在安静环境下适应性饲养1 W，室温（22±2）℃，相对湿度55%～60%。给予充足清洁饮水，自由摄食。

1.1.2 药物与试剂 丹溪痛风胶囊由苍术、黄檗、防己、威灵仙、制南星、泽泻、车前子各15 g，川芎、桃仁、红花、羌活、桂枝各10 g，土茯苓25 g，萆薢20 g组成，0.5 g/粒，由黑龙江中医药大学实验中心提供；牛Ⅱ型胶原蛋白与弗氏不完全佐剂（IFA）购自美国sigma公司；兔抗大鼠RORγt和Foxp3多克隆抗体，购自武汉博士德生物工程有限公司；蛋白抽提试剂、BCA蛋白定量试剂盒等试剂均由赛诺博公司提供；蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂由Roche提供；山羊抗兔 IgG（H+L），HRP、山羊抗小鼠 IgG（H+L），GAPDH鼠单抗由天德悦公司提供。

1.1.3 主要仪器 MultiSkan3酶标仪 （Thermo），垂直电泳仪、湿转电泳槽（北京六一），水平脱色摇床（其林贝尔），凝胶成像系统 （以色列MiniLumi公司），低温冷冻离心机（上海安亭）；电子天平（梅特勒公司），大鼠足趾肿胀仪（成都泰盟）。

1.2 方 法