张效本，田 葱，赵雪丽，原慧芳

(河南省开封市医学科学研究所 475000)

人巨细胞病毒(HCMV)属疱疹病毒科，为双链DNA病毒，是引起围产儿感染最常见的病毒[1]。HCMV可侵袭多个器官、系统而产生严重疾病[2]。免疫机制发育不成熟的新生儿和婴儿，则可产生肝炎、肺炎、脑膜炎、智力低下、先天性耳聋等严重的感染症状[3]。因此，及早诊断和治疗对疾病的控制和预后有着重要意义。现探讨婴儿血液、尿液、母乳联合检测在婴儿HCMV感染的诊断价值。报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 258例疑似HCMV感染的婴儿来自2015年10月至2017年11月该市妇幼保健院就诊或住院患者，男152例，女106例，年龄28 d至11个月，中位年龄3个月。临床表现为黄疸和(或)肝功能异常者114例，腹泻29例，肺炎45例，脑炎7例，传染性单核细胞增多症3例，心肌炎3例，其他57例。HCMV感染的诊断参考中华医学会儿科学分会发布的《巨细胞病毒诊断方案(1998年)》[4]和《儿童HCMV疾病诊断和防治的建议(2012年)》[5]。

1.2方法

1.2.1标本采集和处理 采用洁净试管收集婴儿晨尿或产妇乳汁(清洗乳头)1.5 mL，10 000 r/min离心5 min留取沉淀物；取婴儿空腹全血1.0 mL加入含EDTA抗凝剂的试管中，使用1.0 mL淋巴细胞液抽提细胞,生理盐水洗涤留取沉淀。不能及时检测的标本―20 ℃保存。

1.2.2仪器与试剂 全自动荧光定量PCR扩增仪，DA7600型，佛山达安医疗设备有限公司生产。HCMV DNA检测试剂盒为中山达安基因股份有限公司产品。

1.2.3HCMV DNA测定 严格按试剂盒说明书操作。将50 μL处理后的尿液、乳汁、血细胞沉淀物，以及等量DNA提取液加入1.5 mL离心管中，100 ℃加热10 min,12 000 r/min离心5 min取上清液2 μL做PCR扩增。FQ-PCR扩增条件：93 ℃,2 min预变性;93 ℃ 45 s→55 ℃ 60 s,10个循环；……