贺茂芳 张 博 唐一梅 韩 禄

(西安医学院药学院，西安医学院药物研究所， 西安 710021)

1 引 言

离子交换色谱(Ion-exchange chromatography, IEC)是生物大分子最常用的分离纯化手段之一[1～3]。根据固定相表面离子交换基团的带电性质，可分为阳离子交换和阴离子交换固定相；根据官能团的解离能力，又可分为强阳/阴离子交换和弱阳/阴离子交换固定相[3]。蛋白质在离子交换固定相上的保留与固定相表面电荷的性质和数量密切相关。理论上，固定相表面的电荷数量越多，即离子交换容量越大，与之发生交换的反离子越多，因此柱容量越大，分离纯化的产量越高。

目前，固定相的制备大多是将小分子功能团直接键合在基质表面，该方法键合的配基密度小，造成固定相的离子交换容量低[4,5]。随着生物工程和生物制药的快速发展，现有固定相已经难以满足复杂生物样品的分离纯化要求。因此，制备新型高容量离子交换固定相具有重要意义。研究表明，向材料表面引入聚合物大分子是提高吸附容量的有效手段[6,7]。原子转移自由基聚合、超支化反应等是向材料表面引入聚合物的常用方法，然而，这些反应条件苛刻、过程复杂，限制了其在实际中的应用[8～10]。聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine, PEI)是一种阳离子聚合物，其分子骨架和支链上都含有大量的氨基。在较低pH值时，高密度的氨基被质子化，可通过静电作用吸附带负电荷的物质。因此，PEI是一种理想的离子交换配体，将其用于固定相的制备，可有效提高固定相的离子交换容量[11]。……