何金华 周红霞 顾影影 李明凯* 王爱民 朱永元

（1 江苏省滨海中学 江苏滨海 224500 2 江苏师范大学生命科学学院 江苏徐州 221116 3 滨海县人民医院 江苏滨海 224500）

活性染色是指利用某些无毒或毒性较小的染色剂显示细胞内某些天然构造存在的真实性，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致细胞死亡的一种染色方法［1］。活性染色按染色途径和方法可分为体外活性染色和体内活性染色，用健那绿染色线粒体属于体外染色，以台盼蓝或者墨汁注入动物腹腔研究吞噬细胞则属于体内染色。

对细胞、 细胞器或其他物质染色的目的是为了对所染色对象进行结构和代谢方面的观察。在众多的染料中，高中生物学所涉及的活性染料有3 种，分别是健那绿、亚甲基蓝和台盼蓝，目前高中生物学教学中对健那绿染料的实验过程分析较深入，但对健那绿如何进入细胞染色出现较多的争议，现从活性染料健那绿的化学本质、 染色机理、运输方式及试剂配制4 个方面进行综合分析。

1 化学本质

1.1 化学结构 健那绿，别称詹纳斯绿、 铁苏木精，分子式C30H31ClN6，为具有吩嗪结构的碱性染料。吩嗪结构具有难溶于水、微溶于乙醇等有机物质，固态成针状晶体，颜色为近乎无色等特征。从结构式分析，健那绿中含有4 种基本基团，分别为二甲基胺 （氢原子被取代后认为含叔胺）、 二乙基胺（氢原子被取代后认为含叔胺）、 苯环和吩嗪结构（含仲胺、季胺）（图1）。从整体结构上看，由于该结构属于氯化物的盐类，因此可溶于水，但水解后产生的阳离子基团因携带3 种结构而呈现不同的溶解性质，所以该物质最终表现的化学性质为溶于水还是溶于有机溶剂时必须将其一分为二进行分析。……