薛亮 王爱霞 归翔刚

摘 要 在293细胞培养体系中感染腺病毒后，继续保持培养液中一定浓度的葡萄糖提供碳源，以维持宿主细胞更好的生命状态，促进腺病毒的复制、装配、释放，达到提高单批次病毒生产的产量。在病毒活性比稳定的前提下，改进后病毒颗粒数（产量）有41.1%的提升。

关键词 293细胞 腺病毒 残糖控制

中图分类号：Q813.11 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2018）15-0072-03

Improvement of the process for adenovirus production

XUE liang*， WANG Aixiang， GUI Xianggang

（Shanghai Sunway Biotech Co.， Ltd.， Shanghai 201206， China）

ABSTRACT After infection of adenovirus in the 293 cell culture， a certain concentration of glucose was continuously supplied in the culture medium to maintain the host cell in a better growth condition so as to promote the replication， assembly and release of the adenovirus and to improve the yield of single-batch virus production. The number of virus particles （production） could be improved by 41.1% on the premise of a stable virus activity ratio.

KEY WORDS 293 cell； adenovirus； residual sugar control

随着生物制药的普及和发展，病毒活载体疫苗的研制成为基因工程疫苗研制的热点，其中，腺病毒由于具有独特的优势，成为疫苗载体应用中不可缺少部分[1]。腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界广泛分布，对人致病性小，不诱导癌变，较为安全，不整合入细胞基因组，遗传毒性低，宿主范围广，转染效率高，易于制备、纯化[2]。并且，腺病毒因其宿主细胞广，繁殖滴度高，装载容量大，成为近年来病毒载体研究热点[3]。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因，治疗恶性肿瘤、心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展[1]；利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质，如蛋白酪氨酸激酶1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此，完善293细胞的大规模培养技术及腺病毒扩增技术具有越来越重要的市场意义[4]。腺病毒的生产以细胞感染病毒为分水岭可分为细胞培养和病毒培养2个阶段， 细胞感染病毒后，病毒的释放时机及收获等的生产工艺参数一直是业内关注的重点，而通过生产工艺的不断改进降本增效也已成为业内的共识。……