糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病(DM)的严重并发症之一，在每年新进展至ESRD的患者中，DKD所占比例逐年升高。炎症反应是DKD发病的重要机制之一，而白细胞介素(IL-6)、单核趋化蛋白1(MCP-1)是DKD炎症机制中的重要指标[1]。Krüppel样因子4(KLF4)又名胃肠富集KLF(gut-enriched Krüppel-like factor,GKLF)[2]，它可以调控IL-6[3]、MCP-1、iNOS[4]等因子表达，影响核因子κB(NF-κB)信号通路[5]，从而发挥抗炎或促炎作用。在肾脏炎症方面，KLF4可调控HK-2细胞中MIF、MCP-1的表达[6]，但KLF4在肾小球系膜细胞中是否有表达，以及它对高糖刺激的肾小球系膜细胞炎症是否同样具有调控作用，尚未见报道。因此，本研究拟采用体外培养肾小球系膜细胞模型，使用高糖刺激后，观察KLF4及炎症指标IL-6、MCP-1的表达变化，从而探讨DKD细胞模型中KLF4与炎症反应的关系。

DNA甲基化是表观遗传学的一种修饰方式，它参与了体内多项生理病理过程，而5-氮杂胞苷(5-Azacytidine，5-Az)，是最常用的甲基化抑制剂。在糖尿病肾病中，DNA甲基化水平明显升高[7]，KLF4的表达水平与其转录子甲基化水平负相关，应用5-Az后，KLF4表达水平升高[8,9]，我们前期研究发现，应用5-Az后，可以上调转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人HK-2细胞中KLF4表达[10]。因此，本研究中，我们拟采用5-Az抑制高糖刺激的肾小球系膜细胞的甲基化过程，观察KLF4及炎症指标IL-6、MCP-1的变化，从而进一步寻找KLF4调控DKD炎症反应的可能机制。为探寻DKD的发病机制，寻找DKD的潜在治疗靶点提供理论依据。

材料与方法

实验材料

小鼠肾小球系膜细胞(MES-13) 由ATCC提供。

主要仪器 实时荧光定量PCR仪：美国Applied Biosystems公司、Axygen、ABI；SDS PAGE凝胶电泳与转膜设备、化学发光成像系统：Bio - Rad公司；核酸定量仪NanoDrop Lite、细胞恒温培养箱：Thermo；……