罗国良，王振军，冯二凯，易立，郭利，叶明，张淼，程悦宁※

（1.中国农业科学院特产研究所，长春 130112；2.吉林特研生物技术有限责任公司，长春 130122）

水貂病毒性肠炎又称水貂细小病毒性肠炎，是由水貂肠炎细小病毒（Mink enteritis virus，MEV）引起的以剧烈腹泻为主要临床特征的急性、烈性和高度接触性传染病。在自然条件下，不同品种和不同年龄的水貂均有感染性，但幼貂的感染性极强。水貂病毒性肠炎没有特异性的治疗药物，疫苗接种是控制该病流行的有效手段。

目前，用于水貂肠炎细小病毒免疫预防的常规疫苗主要有灭活疫苗和弱毒疫苗。灭活疫苗常用的传统灭活剂为甲醛，甲醛灭活工艺虽能取得较好的灭活效果，但甲醛易破坏病毒的免疫原性，且其残留易引起机体应激反应。二乙烯亚胺是烷化剂的一种，作为另一类良好的病毒灭活剂，仅破坏病毒的核酸，而不影响蛋白成分结构，能最大程度保持病毒的抗原性[1]，近年来已应用于猪细小病毒[2]、猫杯状病毒[3]、伪狂犬病毒[4]、口蹄疫病毒[5]等多种病毒的灭活，并取得良好的免疫效果。本试验通过使用不同终浓度的二乙烯亚胺（Binary ethylenimine，BEI）对 MEV 进行不同时间的灭活，确定BEI灭活参数，并对BEI灭活和甲醛灭活的水貂肠炎细小病毒灭活疫苗进行了免疫效果对比。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病毒与细胞 水貂肠炎细小病毒MEVB株（中国农业科学院特产研究所保存）；F81细胞（中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库提供）。

1.1.2 主要试剂 MEM培养基、0.25%胰酶-EDTA消化液（Corning公司），2-溴乙胺氢溴酸盐（BEA）（Sigma-Aldrich公司），甲醛（国药集团），其它试剂为国产分析纯。……