陈益国,邓林强,陈 会,熊章华,桂晓美,曾黎峰,喻金梅

(1.江西省人民医院检验科，南昌 330008；2.江西省妇幼保健院肿瘤科 南昌330006)

金黄色葡萄球菌是院内感染率较高的细菌之一，自上世纪60年代检出第1株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)以来，其分离率已逐年上升，目前MRSA已由院内感染扩展到社区[1-2]，自2002年以来，耐万古霉素金黄色葡萄球菌分离逐年增加[3]，使临床用药面临严峻考验[4]。因此，寻找免疫学治疗和预防金黄色葡萄球菌感染已成为人们关注的焦点， TLR2受体是机体免疫系统识别革兰阳性细菌的主要模式识别受体。本课题组前期研究表明，TLR2受体合成配基Pam3Csk4预处理小鼠能显著降低MRSA小鼠肺炎模型的病死率，并在体外能增强巨噬细胞和中性粒细胞的杀菌功能[5-6]，提示Pam3Csk4能增强感染动物对金黄色葡萄球菌的抵抗能力，由于金黄色葡萄球菌血流感染后，脏器脓肿是常见并发症之一，所形成脓肿可源源不断地提供感染源，是金黄色葡萄球菌感染久治不愈的常见原因之一。因此本研究拟用亚致死剂量的MRSA进行小鼠造模，探索Pam3Csk4对金黄色葡萄球菌感染后对肾脏的保护功能。

1 材料与方法

1.1材料 18～22 g的SPF级昆明(KM)小鼠购自于江西省中医药大学实验动物中心；MRSA标准菌株 (MRSA，ATCC43300)于本室保存；PE/CY5.5-anti- Gr-1,PE-anti-CD11b 来源于biolegend公司(美国)，胶原酶Ⅰ和DNAse来源于美国sigma公司，RT-PCR和Q-PCR扩增试剂盒购自TaKaRa公司(日本)，其余试剂均为国产分析纯。Beckman低温冷冻高速离心机、CO2恒温细菌培养箱和 Q-PCR仪(CFX96)由江西省人民医院中心实验室提供。

1.2方法

1.2.1引物合成 由上海英韦创津公司合成下列引物序列，见表1。……