梁宏润 秦浩 林云红 徐倩

种植义齿现已成为恢复患者缺牙功能的可靠治疗手段。骨结合作为种植义齿修复成功的金标准，是种植体承载各向负荷的物质基础。但骨质疏松缺牙患者对口腔的影响主要表现为颌骨骨量的丢失[1]，限制了种植义齿的应用[2]。近年来，随着国内外学者对褪黑素(melatonin，MT)研究的深入，发现与老年性骨质疏松存在一定联系。MT可通过多种途径[3-4]促进成骨细胞增殖分化、抑制破骨细胞活性，并促进骨基质的矿化成熟；同时对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal stem cells, BMSCs)的成骨向、成脂向分化起到重要的调节作用[5]。本研究拟通过构建骨质疏松大鼠模型，在其胫骨干骺端植入已制备好的褪黑素-骨髓间充质干细胞膜片-纯钛种植体复合物，观察褪黑素对骨质疏松动物模型骨结合的影响。

1 资料与方法

1.1 实验动物

2 月龄雌性SD大鼠，健康未孕，体重180～220 g，由昆明医科大学实验动物中心提供。

1.2 实验材料

褪黑素(Sigma，美国)；成骨诱导液(配制含10%FBS，Gibco，美国)；0.2 mmol/L抗坏血酸、100 nmol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸钠(Biosharp生物科技公司，合肥)；纯钛种植体(Φ2 mm×5 mm，深圳名扬义齿加工厂)；电动立式单柱测试台(SJX，上海思为)；Micro-CT(ZKKS-MCT-Sharp-IV，广州中科恺盛医疗科技有限公司)；硬组织切片机(E300CP，EXAKT公司，德国)。

1.3 制备褪黑素-骨髓间充质干细胞膜片-纯钛种植体复合物

取大鼠骨髓原代培养BMSCs，至 P2时经流式细胞仪(FACS Calibur，BD，美国)鉴定，确认后将其诱导成膜，膜片形成后经脱细胞处理、干燥、消毒，接种 P1细胞于膜片上，并置换含褪黑素的成骨诱导液和不含褪黑素的成骨诱导液，培养10 d后将膜片包裹种植体，培养4 d后备用(图 1)。……