张雪 赵欢 李媛 张琦 胡月 史册 孙宏晨

牙作为人体最硬的组织，提供咀嚼、支持、发音、维持面部形态等功能。龋坏、酸蚀、外伤等可造成牙体缺损甚至缺失，影响咀嚼、消化、美观，造成关节紊乱等[1]。随着实验技术手段的提高和牙相关疾病研究的深入，小鼠动物模型成为研究模拟人类牙发育相关疾病发生的不可缺少的一部分，利用转基因技术，建立基因敲除或基因过表达等动物模型[2]，探讨牙发育调控机理。小鼠牙胚标本的制备是小鼠牙胚实验研究的前期重要步骤。组织的固定、脱水以及石蜡包埋等步骤的条件是影响切片质量和染色质量的关键。

牙发育始于牙胚上皮和间充质相互作用，牙乳头在成釉器内釉上皮的刺激下，形成成牙本质细胞，成牙本质细胞再矿化形成牙本质，而内釉上皮在牙本质的刺激下形成成釉细胞，成釉细胞分泌基质形成釉质[3]。多种信号通路参与牙发育，主要包括骨形成蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)、WNT、SHH(sonic hedgehog)和成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor，FGF)信号通路[4]等。研究发现，BMP信号通路异常导致牙胚发育停留在牙板期/蕾状期[5]，而BMP信号增强又可促进修复性牙本质的形成[6]。

BMP信号通路的激活需要受体的激活以及下游信号的传导[7]。BMP受体包括Ⅰ型和Ⅱ型受体[8]。BMP和受体结合后，主要依赖Ⅰ型受体的GS偶联区激活下游的SMAD1/5/8，从而发挥信号传导的作用[7]。Ⅰ型受体包括ALK3(activin receptor like kinase 3)、ALK6(activin receptor like kinase 6)和ALK2(activin receptor like kinase 2)[7-8]。研究发现，ALK3基因敲除可导致牙发育迟缓[9]，ALK6敲除对牙发育无明显影响，而关于ALK2在牙发育中的作用却未见报道。为了初步探讨ALK2在牙发育中的作用，我们利用免疫组化技术检测ALK2蛋白在牙发育中的表达分布。……