张树敏 廖秀冬 吕 林 张丽阳 罗绪刚

(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，矿物元素营养研究室，北京 100193)

小肠是动物重要的消化器官，是营养物质主要的消化与吸收的场所。而小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells，IEC)作为体内更新最快的一类细胞，是肠道内外环境的媒介，又是机体免疫屏障的重要组成部分，具有消化、吸收、分泌、免疫等重要的生理功能[1]。小肠上皮细胞在一定条件下可进行体外分离和培养。体外分离培养小肠上皮细胞对于研究肠道生物学功能、营养物质吸收机制及其调控以及小肠上皮细胞增殖和分化提供了简单、快速的手段，并为研究营养素及其他外界因素对肠上皮的作用提供了理想的体外模型[2]。一般而言，体外培养胚胎组织比成体组织更易生存和生长，因而其细胞分离后容易培养成功。而成体组织中大部分是非繁殖的分化细胞，当细胞分化时生长受到严重抑制或完全停止，并且成体组织的年龄越大，体外培养的成功率越低，这可能与胚胎干细胞的分化水平有关，故成体来源组织培养细胞增殖极为困难，且培养周期缩短[3]。李艳等[4]选取9胚龄鸡胚，Guo等[5]选取17胚龄鸡胚，马玉龙等[6]和古少鹏等[7]选取18胚龄鸡胚，Derache等[8]选用大于18胚龄的将出壳鸡胚，贾国东等[9]选取20胚龄鸡胚进行小肠上皮细胞原代培养，均已成功构建小肠上皮细胞体外原代培养模型。以上文献中选取的鸡胚多集中在18胚龄左右，故本试验选用18胚龄鸡胚十二指肠上皮细胞进行原代培养。……