刘民 ，贾帅军 ，高祎 ，赵成相 ，李丹

1．空军军医大学西京医院全军骨科研究所，陕西西安 710032；2．西安市红会医院脊柱病院，陕西西安 710054

创伤、感染及退变等多种因素均能引发关节软骨损伤，由于成熟关节软骨不具有血管结构，通过其自身修复的几率较低[1-2]，而且大量的临床实践表明通过保守及手术方式都无法获得较满意的临床结果。 近些年，组织工程方法为关节软骨缺损修复提供了一种极具希望的治疗策略[3-4]。人类关节软骨是由少量的软骨细胞和大量细胞外基质构成，而关节软骨的细胞外基质（articular cartilage extracellular matrix,ACECM）主要成分有胶原及蛋白聚糖等生物活性成分[5]。通过复合方法获得的ACECM去除了供体细胞成分，大大降低了其免疫原性，同时保留了大量基质中的胶原及粘多糖成分。ACECM作为具备好生物相容性和生物活性的天然生物材料，在组织工程软骨修复领域具有广阔的应用前景[4，6]。基于该实验室前期的实验探索及牛膝关节丰富的来源，该实验就来源于成年牛膝关节（5只10个膝关节）的ACECM支架材料制备及其特性进行研究，以期为临床应用奠定实验基础。

1 材料与方法

1.1 关节软骨取材与颗粒粉碎

①在无菌环境中以手术刀仔细切取牛关节软骨，用含有抗生素（青霉素及链霉素双抗）的PBS溶液将获得的关节软骨薄片冲洗3次，置于超净细胞培养太中晾干；随后使用液氮浸没干燥后的关节软骨薄片，迅速将硬化后的软骨片投入粉碎机，高速粉碎后小心收集获得的软骨颗粒。……