2018年第一季度广东湛江地区规模化猪场猪群重大疫病抗体检测与分析

2018-08-09台凡力黄如渠岑建明廖春燕

中国猪业 2018年7期

台凡力黄如渠岑建明廖春燕

（广东湛江农垦畜牧有限公司，广东湛江 524022）

2018年春季，生猪价格低迷，养猪行业亏损严重，猪场开始减少对猪群的投入以节约成本。这种情况很容易造成重大疫病的发生和流行。为了解规模化猪场对猪群的免疫状况以及猪群的健康状态，对广东湛江地区8家规模化猪场进行抽血检测，调查猪群的免疫状况、健康程度。采集251头经产母猪血清，进行猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪圆环病毒病（PCVD）和猪伪狂犬病（PR）等4种猪病毒病的免疫抗体检测和分析。

1 材料和方法

1.1 材料

2018年4月，在广东湛江地区8个规模化猪场采集251头经产母猪血清。

采用美国IDEXX公司生产的猪瘟病毒抗体检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒（gB）、猪伪狂犬病毒抗体检测试剂盒（gE）和韩国金诺公司生产的猪圆环病毒病检测试剂盒进行血清学检测。

主要试验用仪器有MK3酶标仪、MK2自动洗板仪、Milli-Q-A超纯水机、单道微量移液器、多道微量移液器、涡旋混合仪等。

1.2 样品采集

每个猪场一次采集血样不少于30份。血样采集后及时进行常规血清分离，冷冻备检。

1.3 抗体测定

1.3.1 CSFV抗体测定

取50 μL血清，按照CSF病毒抗体检测试剂盒的说明进行抗体检测，读取450 nm处样本的吸光度值。有效的检测结果为阴性对照平均OD450＞0.500，阳性对照的阻断率大于50%。如果被检样品阻断率≥40%，则判为阳性；如果被检样品的阻断率≤30%，则判为阴性；如果被检样品的阻断率在30%～40%之间，则判为可疑，需重复检测。如果重测结果仍可疑，就使用血清中和试验进行最终确认。

1.3.2 PRRSV抗体测定

取10 μL血清，按照PRRS病毒抗体检测试剂盒说明进行抗体检测，读取630 nm处样本的吸光度值。阴性对照平均OD630≤0.150，阳性对照的平均值减去阴性对照的平均值≥0.150时，检测结果有效。被检样品阻断率≥40%，判为阳性；被检样品的阻断率≤30%，判为阴性；如果被检样品的阻断率在30%～40%之间，判为可疑，需重复检测。

1.3.3 PCV2抗体测定

取10 μL血清，按照PCV2病毒抗体检测试剂盒说明进行抗体检测，读取450 nm处样本的吸光度值。阴性对照的平均OD450≤0.30，阳性对照的平均值≥0.50时，检测结果有效。如果被检样品S/P值≥0.40，判为阳性；被检样品的S/P值≤0.30，判为阴性；如果被检样品的0.3≤S/P≤0.4之间，判为可疑，需重复检测。

1.3.4 PRV（gB/gE）抗体测定

取50 μL血清，分别按照PRV gB和gE病毒抗体检测试剂盒的说明进行抗体检测，读取630 nm处样本的吸光度值。阴性对照的平均OD630减去阳性对照平均值＞0.3，检测结果有效。被检样品阻断率≥0.70，判为阴性；被检样品的阻断率≤0.60，判为阳性；如果被检样品的阻断率在0.60～0.70之间，判为可疑，需重复检测。

1.4 离散度分析

离散度（CV）采用变异系数表示。被检测猪场免疫抗体的离散度≤40%，判为猪场免疫抗体比较整齐，防疫工作比较扎实。反之，离散度＞40%，认为猪场免疫水平参差不齐，免疫效果不理想。

2 结果与分析

2.1 CSFV免疫抗体的检测结果与分析

2018年4月，抽检猪血清248份，CSFV免疫抗体阳性数229份，阳性率为92.33%。优势抗体（S/N≥60%）190份，占群体比重76.61%。离散度平均为25.26%（表 1）。

由表1可见，该地区规模化猪场CSF免疫抗体水平非常高，对猪群有保护作用的合格抗体所占比例大，阳性合格率达到了国家有关部门的要求（抗体阳性率大于70%）。特别是优势抗体（S/N≥60%）所占比重超过半数，CSF免疫状态良好，免疫效果非常理想。CV小于40%，免疫抗体非常整齐。抽检的8家猪场中有7家猪场免疫合格率超过96.00%，显示该地区规模化猪场没有放松对猪瘟的免疫。

2.2 PRRSV免疫抗体的检测结果与分析

2018年4月，抽检血清251份，PRRSV阳性血清抗体221份，阳性率为88.05%。CV为65.15%。有21份血清抗体S/P≥3.0，分布在7个猪场。

表1 2018年4月份CSFV免疫抗体检测结果

由表2可见，该地区规模化猪场PRRS免疫抗体水平较高，但免疫抗体的离散度大于40%，说明免疫效果并不理想。7个猪场中有21份血清抗体S/P≥3.0。根据经验，当S/P≥3.0时，怀疑有野毒感染，因此这7家猪场PRRS野毒感染压力巨大，PRRS的防治工作不容乐观。特别是编号为8号的猪场，血清抗体阳性率不高，且S/P≥3.0占比非常大，同时CV大于100；编号为2号的猪场，抗体阳性率虽达100%，但是S/P≥3.0所占比例也非常大。总的来说，该地区规模化猪场PRRS的免疫工作不到位，防治工作不理想。

表2 2018年4月份PRRSV免疫抗体检测结果

2.3 PCV2免疫抗体的检测结果与分析

2018年4月，抽检血清248份，PCV2血清抗体阳性243份，阳性率为97.98%。CV为17.61%。

由表3可见，该地区规模化猪场的PCV2抗体水平、阳性抗体合格率很高，抗体离散度非常小。8家猪场中有5家抗体阳性率达100%，并且CV都很小。另外编号为5号和8号的猪场离散度偏大，抗体滴度偏高，怀疑有野毒活动。总的来说，该地区规模化猪场对PCV2的免疫工作到位，防治工作比较理想。

2.4 PRV免疫抗体的检测结果与分析

2018年4月，8家猪场共抽检血清251份，gB抗体阳性251份，阳性率为100.00%，CV为27.56%；在抽检的8家猪场248份血清中，gE阳性93份，分布在4家猪场。

表3 2018年4月份PCV2免疫抗体检测结果

表4 2018年4月份PRV（gB）免疫抗体检测结果

由表4可见，该地区规模化猪场PR免疫抗体合格率非常好，免疫合格率高达100%，并且CV小于40%。说明该地区规模化猪场对PR比较重视，疫苗免疫非常到位。由表5看出，半数的规模化猪场伪狂犬病野毒已经转阳，其中有编号为1、2和4的3个场野毒检出率非常高，分别是85.71%、100.00%和95%，说明伪狂犬病野毒非常活跃，正在发生或者流行。但是这3个场gB抗体的离散度非常小，分别为17.85%、24.15%和33.05%，说明猪场已经做了补救措施，疫苗免疫到位，并且效果确实。另外1个编号为8号的场，虽然检测结果为阳性，但是检出率比较低，同时gB抗体离散度只有15.20%，怀疑是刚刚感染，也有可能是检测误差。剩余4个场野毒检测均为阴性，其中编号为3号和5号的场gB抗体离散度分别为14.53%和16.05%，说明这2个场免疫程序合理，免疫效果确实；编号为6号和7号的2个场，gB抗体离散度分别为48.52%和51.13%。说明这2个场虽然免疫的疫苗效果确实，但是免疫程序还需要稍微调整。

表5 2018年4月份PRV（gE）免疫抗体检测结果

2.5 CSFV、PRRSV、PCV2和PRV免疫抗体检测结果及分析

采集251份血清，其中有3份血清量不足，只检测了PRRS和PR项目，而未检测CSF和PCVD项目。CSF、PRRS、PCVD和PR免疫抗体合格样品分别为229、221、243和251份，免疫抗体合格率分别为92.23%、88.05%、97.98%和100.00%，CV分别为25.26%、65.15%、17.61%和27.56%，见表6。

该地区规模化猪场抽检血清的CSF、PRRS、PCVD和PR免疫抗体合格率非常理想，都高于85%，说明该地区规模化养殖场在市场低迷的情况下，并没有减少对生物安全措施的投入，免疫程序合理，免疫力度比较大。猪群的免疫抗体水平高，免疫状态和健康状况好。

表6 2018年4月份CSFV、PRRSV、PCV2和PRV免疫抗体检测结果

3 讨论

3.1 猪瘟

CSF是由CSFV引起的一种急性热性全身性败血性传染病，各年龄猪均可发病。现在我国已将该病列为一类传染病，是当前养猪业重点防控的重要疾病之一。从抽检结果看，该地区规模化猪场对猪瘟的防治工作比较重视，免疫工作精准到位，免疫抗体合格率高。猪群比较健康，对CSFV疫苗的免疫应答比较敏感。另外也可推测，这一地区市面流行的猪瘟疫苗质量比较有保障，效果比较确实。所以这一地区猪瘟感染压力相对较小。

3.2 猪繁殖与呼吸综合征

PRRS是由PRRSV引起的一种繁殖与呼吸道症状的传染病。临床表现为厌食、发热、母猪繁殖障碍、怀孕母猪大批流产、产死胎和木乃伊胎，仔猪与育成猪发生以高死亡率为特征的急性传染病，我国将其列为二类传染病。目前对该病的控制措施主要是疫苗接种，因此对PRRSV抗体的监控成为规模化猪场控制该病的一种重要手段。但是用血清抗体来评估PRRSV疫苗的免疫效果不科学，因为PRRS具有免疫介导作用。目前主要利用动态监测和横向对比来评估PRRS免疫抗体。在本研究中，该地区不同的8个规模化猪场PRRS免疫抗体差别明显，PRRS的防治效果差异很大。PRRS属于猪的免疫抑制性疾病，使得猪群的免疫机能受到抑制，其他疫苗的免疫效果明显下降。结合对CSFV、PCV2和PRV的检测结果来理解PRRS抗体的水平更有意义。当CSF、PCVD和PR 3种病毒病的免疫抗体效果都比较理想时，说明这一时期猪场没有出现免疫抑制性疾病。此时如果PRRSV抗体水平比较高，基本可以认为疫苗免疫效果比较好；如果PRRSV抗体水平比较低，说明疫苗免疫不到位。当其他3种病毒病的免疫抗体效果都不理想的时候，如果PRRSV的抗体水平比较高，或者比较低，抑或比较乱，都可以说明猪场正在流行PRRS。本研究抽检的8家猪场中，尽管个别猪场出现一种或两种病毒病疫苗免疫不合理，但是总体来说，这3种病毒病的抗体还算比较理想。猪群的免疫状态不错，并没有发生PRRS的流行，但是这一时期各个猪场的PRRS的CV都比较大，说明这一时期疫苗免疫效果不理想。