李贤

【摘要】：本方法利用葡萄糖氧化酶能催化氧化葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在辣根过氧化物酶的作用下氧化邻联茴香胺生成水和红色产物，通过测定产物吸光度变化速率用分光光度法定量计算出葡萄糖氧化酶活力。经研究在酶浓度为0.1～0.5GODU/mL，缓冲液pH为6.0，水浴温度为30℃的条件下，该方法具有有良好的重现性和稳定性。

【关键字】：葡萄糖氧化酶活力；邻联茴香胺；分光光度法。

1 引言

葡萄糖氧化酶是一种绿色饲料添加剂，在饲料和畜牧生产中可作为抗氧化剂减缓饲料氧化变质[1]，改善动物肠道微生物平衡[2]，提高饲料利用率[3]，促进动物生长，降低中毒反应更在一定程度上替代抗菌药物和抗球虫病药物，具有广泛的应用前景。

由于葡萄糖氧化酶的高度专一性，基于不同的酶活定义而建立的检测方法主要有电化学法、测压法、凝胶电泳法、滴定法、分光光度法和傅立叶变换红外光谱法等[4]。电化学法、测压法、凝胶电泳法存在方法操作复杂，要求严格，有很强的仪器依赖性；滴定法存在工作量大、样品需要量大、人工读数导致的测量精度低，尤其在混合型饲料添加剂的检测中不能排除酸性、碱性载体干扰的缺点。傅立叶变换红外光谱法是较新开发的一种检测方法，优点为检测速度快，试剂用量少。缺点为仪器要求和模型建立需要前期投入太大，限制了其使用范围。因此寻找一种简便，快捷，灵敏的高的酶活力检测方法很有意义。……