孙妍，董学旺，魏俊利，薛淑霞



虾肝肠胞虫环介导等温扩增法（LAMP）的建立

孙妍，董学旺，魏俊利，薛淑霞通信作者

（天津市水生动物疫病预防控制中心，天津 300221）

为建立一种快速检测虾肝肠胞虫（EHP）的环介导等温扩增法（LAMP），根据GenBank中登录的EHP-SSU基因序列设计6条特异性引物，成功建立了EHP-LAMP检测方法。该方法检出限为3.71个质粒拷贝/μL，并且与虾其他常见病毒病的病原（WSSV、IHHNV、CMNV）均无交叉反应。采用LAMP方法和常规PCR方法对30份具有典型EHP感染症状的对虾样品进行检测，结果显示：LAMP和PCR方法的阳性检出率均为100%。结果表明，建立的EHP-LAMP方法具有高灵敏度、高特异性、高准确度的优点，为对虾肝肠胞虫的快速早期诊断奠定基础。

对虾；肝肠胞虫；环介导等温扩增；检测

虾肝肠胞虫（, EHP）又称肠胞虫，属于微孢子虫，于2009年在泰国养殖的生长缓慢的斑节对虾（）中首次被分离和命名[1]，主要感染南美白对虾（）、中国对虾（）、斑节对虾（）等重要养殖对虾，是近几年新发现的寄生于对虾肝胰腺组织的新病原。早期感染EHP的对虾一般不会立即出现死亡，也没有明显的症状，仍然可以正常摄食，且体色正常，使得该病很难在养殖前期发现，通常养殖30～45 d后才会出现生长缓慢或生长停滞的症状[2-3]，且EHP的感染会导致对虾消瘦，大小和重量不均[4]，造成一定的经济损失。因此，在养殖生产中也将患病虾称作“老头虾”。自2013年以来，我国广东、浙江、江苏、辽宁、天津等地区的南美白对虾苗种和养殖虾的EHP阳性检出率逐年升高，几乎成为这些地区的主要流行病原[5-7]，严重影响了我国对虾进出口贸易和对虾养殖产业的发展。……