肺癌患者血清特异性核酸适配体的筛选及鉴定
2018-08-01赵运旺卢坤玲
分子影像学杂志 2018年3期
邸 娅,赵运旺,卢坤玲,何 雷,徐 欢,郑 岳
1秦皇岛市第一医院,河北 秦皇岛 066000;2燕山大学环境与化学工程学院,河北 秦皇岛 066004
肺癌患者的5年生存率极低,仅有5%~10%[1]。早期诊断和早期治疗是提高肺癌生存率的关键。目前,临床上采用肺癌血清肿瘤标志物联合检测的诊断手段,提高了肺癌诊断的准确性和灵敏度[2]。最常见的肺癌血清肿瘤标志物有:神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)等[3]。血清中蕴藏着丰富的与疾病早期诊断相关的组织学信息,血清中包含有白蛋白、免疫球蛋白、转铁蛋白、脂蛋白等高丰度蛋白。小分子量蛋白质组学研究的对象包含有几类重要生理学功能的蛋白,像细胞因子类、炎症趋化因子类、多肽类激素,另外还有大分子量蛋白的酶切片段和大量的肿瘤标志物,它们与疾病的发生发展关系密切[4-6]。
核酸适配体(Aptamer)是一种具有高亲和力、强特异性的识别目标靶分子的ssDNA或RNA[7],其作用的靶标分子范围比较广泛,无免疫原性,稳定性好且易于修饰等,因而可以代替抗体用于临床检测和治疗。Aptamer的筛选主要依赖于SELEX技术,SELEX技术自创立以来发展迅速,已在生物学和基础医学研究、临床检测和诊断以及药物开发和疾病治疗等领域得到广泛应用[8-10]。本实验采取的消减SELEX技术是一种新型的改良SELEX技术,其主要原理为SELEX筛选时去除与非特异靶标分子结合的ssDNA,然后将消减后的次级ssDNA文库作为目标靶分子结合的文库进行筛选。……
登录APP查看全文
