尉春艳,弥少茹,常 健,张 熙

(1西安交通大学第二附属医院妇产科,西安 710004;2陕西省澄城县医院妇产科;3西安交通大学第二附属医院神经外科;*通讯作者,E-mail:weichy1023@163.com)

卵巢癌是最常见的女性恶性妇科肿瘤,其治疗方案主要是手术、化疗和放疗。由于卵巢癌发病隐匿,明确诊断时往往已经是晚期,死亡率高,预后差。在这种情况下,化疗对于这一类患者尤为重要。紫杉醇联合铂类的治疗是卵巢癌的一线化疗方案,大部分的卵巢癌患者最初对联合化疗敏感,但大约15%首次诊断为卵巢癌的患者即对此方案无反应,60%以上的复发卵巢癌也表现出对该化疗方案的耐药性[1]。如何提高患者对化疗方案的敏感性对于提高卵巢癌患者的预后十分重要。有研究表明,肿瘤新生血管对于肿瘤的生长十分重要。化疗药物能够导致血管内皮细胞损伤,凋亡,导致新生血管明显减少。但是化疗结束后2-3周血管内皮细胞会缓慢修复,这可能是卵巢癌对化疗耐药的原因之一[2]。因此,抑制血管生成可能能提高卵巢癌的化疗效果。本研究拟用血管抑制多肽alphastatin联合紫杉醇,观察该方案对卵巢癌的治疗效果。

1 材料与方法

1.1 细胞株及主要试剂

人卵巢癌细胞株SKOV3购于中科院上海细胞库。紫杉醇购自江苏奥赛药业,alphastatin多肽序列为ADS GEG DFL AEG GGV RGP RVV ERH,纯度为95%,由上海吉尔生化有限公司合成。鼠抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)购自美国Santacruz公司,AKT和PI3K抗体购自英国Abcam公司。

1.2 细胞培养

用含10%小牛血清的1 640培养基培养人卵巢癌细胞株SKOV3,于37 ℃,5% CO2培养、常规传代,待细胞生长至取对数生长期,0.25%胰蛋白酶进行消化,用PBS制成细胞悬液,调整细胞密度至3×107/ml,为构建动物模型做准备。……