夏修良 薛栋 董雪

滨州市人民医院1普外一科，2医院办公室（山东滨州 256610）

胆管癌是指起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤，早期诊断率低，易发生淋巴结转移和神经浸润，且对放化疗敏感性较低，胆管癌患者的自然病程约6个月到1年［1］。因此，临床上急切需要探索胆管癌恶性侵袭和转移的分子机制，以找寻高效的预后分子标志物，这对于提升胆管癌的总体临床治疗效果、降低肿瘤致死率具有极其重要的意义。CUL4A（cullin 4A）是新发现的一种CRLs（cullin⁃ringbased E3⁃ligases）泛素连接酶，定位于13q34染色体，CUL4A在多种恶性肿瘤中有高表达，并可作为肿瘤预后的独立因素［2］。沉默卵巢癌细胞中CUL4A基因后，肿瘤细胞的侵袭及迁移能力受到明显抑制［3］。血管内皮生长因子（vascular endotheliar growth factor，VEGF）在调控血管内皮增殖及迁移等过程中起重要作用［4］。上皮-间质转化（epithelial mesenchymal transition，EMT）是促进肿瘤细胞侵袭及转移的中心事件。N-钙黏蛋白（N⁃cadherin）是EMT发生过程中的一个重要分子［5］。目前，关于CUL4A、VEGF和N⁃cadherin在胆管癌组织中的研究文献报道较少。本实验应用实时荧光定量 PCR（quantitativereal⁃time PCR，qRT⁃PCR）技术和免疫组化方法检测胆管癌组织中CUL4A与VEGF、N⁃cadherin的表达，并探讨其在胆管癌侵袭转移中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2008年1月至2014年1月滨州市人民医院72例胆管癌临床标本，病理证实均为腺癌。男50例，女22例；年龄35～77岁；高分化为31例，中分化为22例，低分化为19例；肿瘤位于肝门部31例，胆总管41例；淋巴结无转移37例，伴有淋巴结转移35例。选取同一个期间36例正常胆管组织（肝内胆管结石行半肝切除或肝部分切除病例）作为对照组。另外，笔者还收集了2011年2月至2013年12月35例新鲜胆管癌和15例正常胆管（肝内胆管结石行左肝外叶切除病例）手术切除标本，立即置于-80℃冰箱或液氮罐中保存。……