王雪银 李宜培

河南医学高等专科学校微生物与免疫学教研室（郑州 451191）

微小RNA（microRNA，miRNA）是一类非编码的小分子RNA，能够通过和靶基因mRNA的3′UTR段结合抑制其蛋白质的表达发挥作用［1］。人源miR⁃107最早被证实作为一个关键的调控因子参与糖的代谢［2］。近来的研究表明miR⁃107在早期的阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease，AD）患者脑中表达下降，与AD特征性的病理特征神经纤维缠结和炎性斑块的水平呈负相关［3］，并且miR⁃107还能通过调控淀粉样蛋白剪切酶BACE1的功能，加剧AD患者的记忆力损伤［4］。此外，β淀粉样蛋白（amyloid β⁃protein，Aβ）转基因小鼠的研究证实miR⁃107参与了丝氨酸蛋白水平的调节和棒状结构的形成［5］。以上的研究结果说明miR⁃107可能参与了AD的病理过程，影响了其学习记忆能力，但是具体的分子机制现在还不清楚。为了探讨miR⁃107在AD病理过程中的具体机制以及对AD导致的学习记忆障碍的作用，本研究利用立体定位注射系统在AD模型鼠海马区上调miR⁃107的表达水平，并检测其对AD模型鼠突触相关蛋白NMDA受体2B（NR2B）和谷氨酸受体1（GluR1）以及学习记忆损伤的影响。

1 材料与方法

1.1 材料和试剂 miR⁃107表达慢病毒颗粒有本室包装和保存。293FT（人胚肾细胞）购自美国ATCC中心，由本室传代并保存。IMDM（含GlutaMAX）、FBS、MEM Non⁃Essential Amino Acids（NEAA）、GlutaMAX I、TrypLE express、双抗、Neurobasal、B27购自Gbico公司，NR2B一抗、GAPDH抗体购自Ab⁃cam公司。BCA蛋白测定试剂盒，免疫印迹的二抗Odyssey Second antibody购自Pierce公司。硝酸纤维素膜（NC）购自Hybond公司，转基因小鼠垫料食物购自北京华阜康。AD模型鼠由本室饲养保存。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组及病毒注射 选取6～8个月龄的雄性AD模型鼠，实验动物分为miR⁃107表达病毒组（病毒组）和空载体病毒组（对照组）。……