张艳红 尹晓茜 霍琰 王润芳 邢邯英 刘素新

河北省人民医院1产科，3临研中心（石家庄 050051）；2河北北方学院研究生院（河北张家口 075000）

内脂素（visfatin）是一种主要由胎盘和内脏脂肪组织表达和分泌的脂肪细胞因子，可参与炎症反应的调节，参与糖脂代谢，还与胰岛素抵抗（IR）和妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）发病密切相关。然而GDM患者visfatin水平升高或降低，及visfatin在GDM发病机制中的作用仍存在争议。

过氧化物酶增殖物激活受体（PPAR⁃γ）是一种细胞核受体，国外一项研究表明，在人巨噬细胞中PPAR⁃γ参与诱导visfatin基因表达［1］，而在滋养细胞PPAR⁃γ是否参与visfatin表达的调节，国内外未见研究和报道。c⁃Jun氨基末端激酶（JNK）属于丝/苏氨酸蛋白激酶，能够被多种细胞因子和应激激活，如：紫外线照射、内质网应激、氧化应激、炎症因子等，被认为是联系炎症和IR的重要信号转导分子［2］。本研究以葡萄糖作用于人滋养细胞（BeWo）观察visfatin、PPAR⁃γ及p⁃JNK表达的变化，探讨葡萄糖对visfatin表达的调节及是否通过PPAR⁃γ和JNK通路，旨在发现GDM发病的分子机制和寻找GDM的治疗靶点。

1 材料与方法

1.1 实验分组及方案 接种BeWo细胞（购自中国协和医院细胞中心）于六孔板中，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的孵箱中培养，于对数生长期分别加入不同浓度的葡萄糖（0，5.5，10，30 mmol/L，Sigma公司）作用48 h，提取RNA，RT⁃PCR检测细胞visfatin、PPAR⁃γ mRNA表达；接种BeWo细胞于25 cm2培养瓶中培养，于对数生长期加入不同浓度的葡萄糖作用48 h，提取总蛋白，Western⁃blot检测细胞visfatin、PPAR⁃γ及p⁃JNK蛋白表达；留取干预后的培养液，ELISA检测visfatin的分泌水平。

1.2 检测指标和方法

1.2.1 实时定量聚合酶链反应（RT⁃PCR）检测各组细胞visfatin、PPAR⁃γ mRNA表达 葡萄糖作……