张凡庆 ，陈玉雪 ，杨 亮 ，朱建国

（1.上海交通大学农业与生物学院 上海 200240； 2.上海市兽医生物技术重点实验室，上海 200240； 3.上海富朗特动物保健股份有限公司，上海201502）

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED） 是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemi c diarrhea virus，PEDV）感染引起的一种高度接触性肠道传染病。发病猪表现为水泄、呕吐、脱水，甚至死亡［1］。各年龄段的猪都可以被感染，仔猪感染后症状最为严重，发病率和死亡率达到100%。PED最早在1971年英国的伦敦发生，之后在1978年才分离到第1株PEDV。我国在20世纪80年代首次出现了PED病情报道。该病在2010年以前为散发，没有受到重视。2010年秋季以后，该病突然在我国出现了暴发，造成大量仔猪死亡，许多猪场甚至出现了没有仔猪可养的状态，造成了巨大的经济损失。2013年该病又传播至美国，对美国养猪业造成了沉重的影响［2，3］。

PEDV属于冠状病毒科（Coronaviridae）， 冠 状 病 毒 属（Conronavirus）。病毒粒子呈圆形或椭圆形，具有囊膜，囊膜表面具有纤突。PEDV的基因组为28 000 nt，是目前已知的最大的动物RNA病毒。PEDV基因组具有7个开放阅读框（open reading frames，ORFs）， 编 码四个结构蛋白和三个非结构蛋白，四个结构蛋白分别是纤突蛋白（Spike，S）、小膜蛋白（Envelope，E）、囊膜蛋白（Membrane，M）和核衣壳蛋白（Nucleocapsid，N）［4］。这些病毒蛋白在PEDV的黏附、入侵、复制、组装、出芽和免疫逃避中发挥了重要的作用。

单链抗体（single chain fragment variable， scFv）是一种基因工程抗体，它是将抗体的重链可变区和轻链可变区通过一个短的柔性肽段连接而成［5］。scFv保留了抗原结合活性，分子量仅为完整抗体分子的1/6。由于scFv只有抗体的Fc片段，避免了使用过程中的种属问题。目前通常使用噬菌体单链抗体展示技术筛选抗体，该方法将编码的scFv通过基因工程的方法与噬菌体外壳蛋白基因偶联，使scFv被外壳蛋白携带并展示在噬菌体的表面，然后通过筛选富集方法获得具有亲和力和特异性的重组噬菌体。……