蔡教英，姚丽锋，王小玉，游淑珠，丁琦

（珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心，广东珠海 519015）

随着生物技术的快速发展，全球转基因作物的种植面积持续增加。全球转基因作物累计种植面积由170万公顷（1996年）增加至20亿公顷（2015年），且转基因作物的种植面积前6位的国家一次是美国、巴西、阿根廷、印度和中国[1]。近年来，转基因作物带来的食品安全和环境安全问题一直是一个关注的热点，目前公众对转基因作物到底含有哪些转基因及其相应含量尤为关注，因此许多国家和地区均出台了转基因限量规定，并实施了标识管理措施。然而各个国家或地区做规定的限量标准和标识管理措施存在很大差异[2]，为了打破国际贸易壁垒和促进标识管理制度的顺利进行，迫切需要对作物中转基因含量建立可靠、准确的定量分析方法。

目前应用最广的定量检测方法是实时荧光定量PCR技术，该方法需要通过标准曲线来进行定量，但是在建立标准曲线的过程，容易受到样品中抑制剂等的影响，导致准确性降低[3]。数字 PCR（digital polymerase chain reaction PCR，dPCR），又成为“第三代 PCR”技术，是一种近年来发展迅速的检测手段，在转基因成分检测领域拥有巨大的潜能。微滴式数字PCR（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）是将反应体系分割成很多微小的反应微滴，实现每个反应微滴只有单个模板分子进行PCR扩增，根据泊松分布原理，按阳性微滴与阴性微滴数的比例计算目标分子拷贝数，实现绝对定量[4,5]。国内外已有将微滴式数字 PCR平台应用于精准定量转基因拷贝数的报道[6～10]。……