进境水产品中典型异尖线虫恒温实时荧光检测法的建立与应用
2018-07-11柏建山赵尚志张森邓艳黄燕琼何淑华戴金石磊
现代食品科技 2018年6期
柏建山,赵尚志,张森,邓艳,黄燕琼,何淑华,戴金,石磊
(1.广州机场出入境检验检疫局国家水产品检测重点实验室,广东广州 510470)
(2.暨南大学食品安全与营养研究院,广东广州 510632)
异尖线虫病是人感染异尖线虫的第三期幼虫引起的疾病,主要是由于食入生的或未熟的海鱼,如寿司和生鱼片等[1]。感染的异尖线虫可以钻入消化道,或移行到其它组织,从而引起人的急腹症症状:如剧烈腹痛、恶心、呕吐、腹泻等[1~4],还能导致人的过敏反应[5~7]。引起异尖线虫病的虫种有6种[8],即简单异尖线虫、典型异尖线虫、抹香鲸异尖线虫、拟地新线虫、对盲囊线虫和宫脂线虫。典型异尖是广大热带及副热带地区的优势虫种,严重威胁了人类的健康[3,4,9],因此建立典型异尖线虫快速准确的检测方法至关重要。
异尖线虫的传统鉴别方法是利用其形态学特征,依据其头端、消化道、尾部结构特征来判断[10]。但各个虫种间形态相似,在不同的生长阶段,其形态、结构存在很大差异,单纯的依靠形态学方法很难鉴定到种间差异。
近年来,利用分子生物学方法鉴定虫种的方法得到发展,如PCR技术。但PCR技术耗时较长、需要在实验室内进行检测,这导致PCR技术很难在基层推广;免疫学方法也因特异性较差而受到限制。
环介导等温扩增(LAMP)技术是一种体外的基因扩增技术[11]。用4条特异性引物识别靶基因的6个区域,并加入两条环引物加速反应,利用一种具有链置换功能的DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在恒温条件(60~65 ℃)反应 30~60 min,即可完成反应。……
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