贺莹

摘 要：该文通过生物酶法合成中对酶反应的各项条件比色法的测定，结果表明，在温度40℃、pH值8.5、底物浓度4%、酶浓度80mg/mL条件下，酶活力最高，金属离子Co2+、Mn2+ 和Ni2+ 对酶活力有促进作用，从而使酶反应的转化率和产品的收率达到最大化，进而可以运用于其工业化的生产。

关键词：酶法合成；D-对羟基苯甘氨酸；茚三酮显色法；酶活力

中图分类号 TS213.2 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2018）03-04-0016-2

Abstract：Enzymatic is to obtain optical pure D-hydroxy phenyl glycine on important way. Based on the enzymatic synthesis of enzyme reaction in the conditions for the determination of colorimetric method，it is concluded that the enzyme reaction optimum temperature of 40 ℃，the optimum pH value of 8.5，the optimum substrate concentration was 4%，the optimal enzyme concentration was 80 mg/mL and metal ions can improve the enzyme reaction dynamic Co2+，Mn2+and Ni2+，etc. So that the enzyme reaction conversion and product yield to maximize，and can be applied to the industrialized production.

Key words：Enzymatic synthesis.；D - hydroxy phenyl glycine；Ninhydrin color；Enzymatic activity

D-對羟基苯甘氨酸，分子量为167.16，熔点为204℃，微溶于乙醇和水，易溶于酸或碱溶液生成盐[1-2]。国内大部分的生产企业基本也都采用乙醛酸工艺生产[3-4]。而这2种方法都为D-对羟基苯甘氨酸的化学生产法，这类方法不仅污染较大，生产过程中会产生氰化物，毒性高，而且原料昂贵、产量低、反应时间长，还会产生大量的废弃物，因而学者们开始研究用酶法生产D-对羟基苯甘氨酸[4-6]。

生物酶法生产又可分为2种，分别为酶拆分法和酶转化法，本实验主要研究酶转化法。酶转化法是指以DL-对羟基苯海因为底物，利用海因酶先将底物水解为N-氨甲酰基-D-对羟基苯甘氨酸，然后再用D-N-氨甲酰基氨基酸水解酶脱去氨甲酰基得到D-对羟基苯甘氨酸[7]的过程。

1 材料与方法

1.1 试剂 D-海因酶，N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶为上海源叶生物科技有限公司，DL-对羟基苯海因，氢氧化钠，盐酸，水合茚三酮，正丁醇为天津市天力化学试剂有限公司生产。

1.2 仪器与设备 高压灭菌锅：江阴滨江，pH计：上海雷磁，紫外可见分光光度计：北分瑞利。

1.3 方法

1.3.1 标准曲线的制备 见参考文献[8-9]。……