绵羊弓形虫TgSheepHn1对小鼠的病理损伤及其抗原分布特点
2018-06-21,,,,,
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刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种细胞内寄生原虫,广泛分布于全球陆地、水域范围内,能够侵染所有恒温动物的有核细胞,从而诱发弓形虫病[1]。猫科动物是弓形虫的终末宿主,绵羊可经过食入含卵囊的饲草或饮水、孕期垂直传播胎儿而感染弓形虫[2],弓形虫病是诱发绵羊流产的病原之一(www.gov.uk/government/statistics)。研究发现,人类和绵羊妊娠期首次感染弓形虫,易引发胎儿发育异常或流产[3],因此弓形虫病对绵羊产业以及人类健康造成危害。分离弓形虫虫株并研究其致病特征是防控弓形虫病的基础工作,目前我国从绵羊体内共分离到3株弓形虫虫株[4-5],本文研究了绵羊分离株TgSheepHn1(ToxoDB#9)[5]对Swiss小鼠的病理损伤及抗原分布特点,补充了我国绵羊分离株的致病特点,为进一步了解弓形虫病的基本特征提供相关依据。
1 材料与方法
1.1弓形虫虫株速殖子与抗体 TgSheepHn1(ToxoDB#9)弓形虫虫株分离于河南省焦作市绵羊心肌[5],虫株经Vero细胞培养获得大量速殖子,保存于本研究室。兔抗弓形虫多克隆抗体、弓形虫抗原均由美国农业部Dubey实验室馈赠,小鼠Specific HRP/DAB(ABC)Detection IHC kit 购自abcam公司(货号:ab64264)。
1.2实验动物及处理 Swiss小鼠15只,≥45 d龄,体重≥25 g,弓形虫检测阴性,购于河南省实验动物中心。小鼠分为3组,2个感染组,1个对照组,每组5只小鼠,雌雄分开,自由采食清洁级全营养颗粒饲料,饮用高压灭菌水。感染组小鼠分别腹腔注射104浓度的弓形虫速殖子,对照组小鼠注射无菌生理盐水,接种量均为1 mL/只。每日观察小鼠临床表现并记录死亡情况。对感染后死亡小鼠的肺脏及肠系膜淋巴结涂片镜检弓形虫速殖子,并用10%的中性福尔马林溶液固定小鼠大脑、舌头、眼球、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺、小肠、肠系膜淋巴结、生殖器官、膀胱和骨骼肌。……
