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小肠结肠炎耶尔森菌(Yersiniaenterocolitica)是一种人兽共患病原菌，感染这种病原体可引起广泛的临床表现，如急性肠炎、小肠结肠炎、末端回肠炎和肠系膜淋巴结炎，严重者还可引发一系列后遗症如肝脾脓肿、关节炎、结节性红斑、耶尔森肝炎和败血症等疾病[1]。OmpA是镶嵌在革兰阴性菌外膜上的一种产量丰富的β-桶装蛋白，该蛋白不仅参与生物膜的形成，还可作为噬菌体和细菌素的受体，对于细菌具有重要的生理学功能[2-3]。近年来，越来越多的研究表明OmpA在鼠疫耶尔森菌、沙门菌属、溶血性曼氏杆菌和鲍曼不动杆菌中都具有良好的免疫原性[4-7]，提示OmpA有可能成为研制这些病原菌疫苗的候选蛋白。本课题组前期研究工作中已发现ompA核酸序列在三种致病性耶尔森菌中高度保守，并且在25 ℃和37 ℃下均是主要的免疫原性蛋白之一，体外免疫杂交实验证明该蛋白具有明显的交叉免疫原性，具备作为致病性耶尔森菌的交叉免疫保护性抗原的潜力[8-10]。本研究使用纯化的OmpA蛋白作为免疫原对大鼠进行免疫，通过体内实验对OmpA的免疫保护作用进行分析。

1 材料与方法

1.1实验菌株和实验动物 小肠结肠炎耶尔森菌Ye92010(1b/O∶8)和Ye92010-ompA重组克隆子均来自本实验室。SD雄性大鼠14只，SPF级，体重280～320 g，购自北京大学医学部实验动物科学部。

1.2主要实验试剂 His蛋白纯化试剂盒购于Novagen公司， BCA蛋白定量试剂盒购自北京康为世纪生物科技有限公司，IPTG购于Amresco公司，弗氏不完全佐剂购于Sigma公司，细菌基因组提取试剂盒购于Qiagen公司，PBS(pH=7.4)购……