蒋洪亮，麻浩，何丽芳，赵修南，单俊杰*，王海南，3*

(1.贵州大学 药学院，贵州 贵阳 550025；2.军事科学院 军事医学研究院 毒物药物研究所，北京 100850；3.国家药品监督管理局，北京 100053)

发酵虫草菌粉(Cs-4)是由我国科技人员从天然冬虫夏草分离获得Cs-4菌株，经人工发酵培养制成。已有文献报道将其用于肝病的治疗，作为补益类药物，推测多糖可能是其主要的药效物质之一。为此，将发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖进行一系列分离纯化，获得均一成分CSMP-60-B-I，对其理化性质及其对ConA抑制人源肝细胞增殖活性的拮抗作用进行了初步研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器

UV-2000紫外分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公司)；高效液相色谱仪(美国Waters公司Delta 600，2414示差检测器)；分析天平(Ohaus公司)；LGJ-25 C冷冻干燥机(北京四环冻干机厂)；DZF-6020真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)；QL-861涡旋振荡器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)；MCO-15AC孵育箱(SANYO公司)；3001闪烁扫描酶标仪(Thermo公司)；BSZ-100型自动部分收集器(上海青浦沪西仪器厂)；Beckman P/ACETMMDQ Capillary Electrophoresis System(美国贝克曼库尔特公司)。

1.2 材料

发酵虫草菌粉(Cs-4，江西国药有限责任公司，批号：Z10890021)。二乙胺基乙基纤维素(DEAE-Cellulose，上海恒信化学试剂有限公司)；Sephadex G-100(Pharmacia公司)；单糖、葡萄糖标准品(Sigma公司)；峰高分子量为6000、1.04×104、4.0×104、6.6×104和2.0×105Da的葡聚糖(Sigma公司)；三氟乙酸(TFA，99%，ACROS ORGANIC公司)；1-苯基-2-甲基-4-吡唑啉酮(PMP，99%，Aldrich公司)；人正常肝细胞株L-O2(军事医学科学院毒物药物研究所李前教授惠赠)；DMEM培养液(Gibco公司)；RPIM-1640液(Gibco公司)；胎牛血清(FBS，浙江天杭生物科技有限公司)；胰蛋白酶(Amresco公司)；噻唑蓝(MTT，Amresco公司)；刀豆蛋白A(Concanavalin，ConA，Sigma公司)；十二烷基硫酸钠(SDS，Amresco公司)；其他试剂均为国产分析纯。……