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利用ISSR分子标记的特征条带鉴别正毛化橘红△

2018-06-21胡珊杨志业邬龙怡李华计周正

中国现代中药 2018年6期
关键词:特征

胡珊,杨志业,邬龙怡,李华,计周正*

(1.广州市香雪制药股份有限公司,广东 广州 510663;2.广东省药品检验所,广东 广州 510180)

化橘红为芸香科植物化州柚Citrusgrandis‘Tomentosa’或柚Citrusgrandis(L.)Osbeck的未成熟或近成熟的干燥外层果皮[1],具有散寒、燥湿、消痰等功效,用于风寒咳嗽,喉痒痰多[2]。化橘红为广东化州道地药材,根据其果实表面绒毛的有无、多少分为大致正毛化橘红、副毛化橘红和光青化橘红,品质和功效以正毛化橘红最优[3-5]、副毛化橘红次之、光青化橘红最差,假西洋品种是外观介于正毛和副毛之间、功效介于副毛和光果的一个较特殊品种,而正毛化橘红和非正毛化橘红的种苗在外观形态非常相似,运用传统方法很难准确区分。以生物分子的多态性为基础的遗传标记,即DNA水平的分子标记如RAPD、ISSR分标记[6-7]等,相对于传统形态标记具有巨大优势,为解决品种混乱和品种优劣问题提供了一种新的手段。本文在ISSR分子标记的基础上建立了一种利用PCR特征条带组合来鉴别正毛化橘红种苗的方法,该方法快速、简便且准确性高,只需要少量样本即可实现正毛化橘红种苗的鉴定。

1 材料与方法

1.1 材料来源

研究实验:正毛化橘红、副毛化橘红、光青化橘红等样品均来自广东省化州市和茂名市,并经广东省药品检验所杨志业副主任中药师鉴定。其中正毛化橘红样品8份,副毛化橘红5份,假西洋品种3份,光青化橘红2份。采集其新鲜叶片并用硅胶快速干燥,采样时间为2016年5月,样品信息见表1。

表1 研究实验……

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