于洪飞，刘 森

(河南理工大学资源环境学院，焦作 454000)

煤炭作为主要能源，在相当长的时期内，在我国能源结构中的地位不会改变[1]。然而，煤中含有多种有害或潜在有害元素，在其采集、洗选、储存、运输过程中，会释放到周边环境中[2-3]。郭二果等[4]研究发现与采矿前比，土壤中As、Hg、Cu、Cd等重金属含量均高于采矿前水平。马从安等[5]对胜利露天煤矿重金属含量调查，发现重金属Cd的含量已经超标。煤矿区土壤中Cd和Pb对人体健康存在健康风险[6]，因此，矿区污染土壤的修复显得尤为重要。在自然界中，微生物在重金属的迁移、转化过程中起着重要作用，可对土壤中的重金属进行固定、移动或转化，改变它们在土壤中的环境化学行为，可促进有毒、有害物质解毒或降低毒性，从而达到生物修复的目的[7]。

本文采用浓度梯度驯化的方法[8]，从校园内长期堆放煤的下层土壤中筛选出对镉具有较强抗性的真菌，运用传统形态学方法和18S rDNA序列分析对菌株进行了鉴定，同时研究菌株对Pb2+、Zn2+、Cu2+、Ni2+、Co2+和Cr2+的重金属抗性，为其实际应用提供参考。

1 材料和方法

1.1 抗镉菌株的筛选与培养

采用梯度浓度驯化法，从河南理工大学校园内煤场采集土样，称取3份土样各10 g加入到90 mL的马铃薯葡萄糖(简称PDA)液体培养基(其中Cd2+浓度为100 mg/L)摇床培养3 d(28℃，150 r/min)，取培养液10 mL加入到PDA液体培养基(Cd2+浓度为200 mg/L)摇床培养3 d(28℃，150 r/min)，依此类推，镉浓度逐渐递增，最后Cd2+浓度达到2000 mg/L。取最后一批的培养液，将菌液涂布于镉离子抗性平板(浓度为2000 mg/L的PDA固体培养基)，培养分离菌株。……