廖兆蒂，刘 真，孙 强

(中国科学院 上海生命科学研究院，上海 200031)

作为第一个由体细胞克隆出的哺乳动物，克隆羊Dolly的诞生为人们研究哺乳动物体细胞重编程开启了一扇新的大门[1]。Dolly之后，科研工作者们便对体细胞重编程寄予了厚望并且相继克隆出牛[2]、小鼠[3]、猫[4]等另外22种哺乳动物[5]，然而克隆灵长类动物截至2018年初依然是该领域的一个未解难题[6]。

1 灵长类克隆研究的发展历程

其实早在1997年美国俄勒冈灵长类研究中心的Don Wolf实验室就已经成功克隆出一雄一雌两只恒河猴，但囿于当时实验条件限制该研究仅采用6～16细胞时期早期胚胎细胞作为核供体细胞[7]。2002年，同样来自Don Wolf实验室的Mitalipov以论文第一作者的身份在Biology of Reproduction发表了一篇利用恒河猴体细胞作为供体进行核移植的研究[8]。该研究将30枚由卵裂球做为核供体获得的胚胎(embryonic cell nuclear transfer, ECNT)和14枚体细胞做为核供体获得的胚胎(somatic cell nuclear transfer, SCNT)分别移植入11只和3只受体，11只ECNT受体中只有一个怀孕并在155天时剖腹产获得一个死胎，3只SCNT受体没有一只怀孕。2003年，Schatten和同事将33枚克隆胚胎移植入16只受体但都没有观察到怀孕迹象，然而他们在116枚ECNT和30枚SCNT胚胎中观察到几乎所有这些核移植胚胎在有丝分裂时都发生了纺锤体紊乱和染色体错位等现象[9]。Schatten等认为移除纺锤体导致了MII卵母细胞中核有丝分裂器(nuclear mitotic apparatus，NuMA)和驱动蛋白相关蛋白(kinesin-related protein，HEST)的缺失或损伤，并进而导致灵长类克隆胚胎不能正常有丝分裂。随后，Paolo Martelli实验室在2004年发表的一篇研究中进一步描述了该现象：重组胚胎中仅有14.8%能够形成正常的纺锤体并进行正常有丝分裂，其他大部分胚胎在微管组装、染色体形成、纺锤体形成中都有或多或少的问题[10]。……