孟 哲，李海禹，陶海龙

(郑州大学第一附属医院心血管内科， 河南 郑州 450052)

心肌纤维化(myocardial fibrosis，MF)是包括高血压、心梗和瓣膜病在内的多种心脏疾病发展到一定程度时所共有的病理改变，是心室重构的主要表现之一[1]。因此，预防和逆转MF和心室重构已成为心血管系统相关疾病研究者们的重点课题。转化生长因子β1(transforming growth factor β1，TGF-β1)是与细胞外基质(extracellular matrixc，ECM)积聚关系非常密切的细胞因子，是促进细胞纤维化的生长元素。Smad3蛋白是TGF-β1信号在胞质内传导的重要分子，与ECM合成及致纤因子分泌等多种生物学行为密切相关[2]。虾青素(astaxanthin，ASTX)隶属胡萝卜素家族叶黄素亚属，存在于大多数甲壳类动物和鲑科鱼类体内[3]。已有研究显示，ASTX能够通过抑制氧化应激和炎症反应，对2型糖尿病和心血管疾病起到抑制作用[4]。此外，Yang等[5]发现，ASTX能够下调高脂喂养的ApoE-/-小鼠血脂水平，增强肝脏内抗氧化酶活性。

本研究探讨ASTX对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CFs)内活性氧(reactive oxygen spices，ROS)生成和胶原蛋白分泌的影响，以及这种作用与TGF-β1/Smad3信号通路间的关系，旨在探讨ASTX改善心肌纤维化的内在分子机制，为其在临床上用于慢性心力衰竭的治疗提供一定依据。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1试剂 DMEM高糖培养液(美国Gibco公司)；ASTX、胎牛血清、噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、TGF-β1(美国Sigma公司)；实时定量PCR试剂盒及逆转录试剂盒(北京TransGen公司)；兔抗大鼠I型胶原(college Ⅰ，Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(college Ⅲ，Col Ⅲ)、Smad3、p-Smad3、β-actin多克隆抗体(美国Santa Cruz公司)；Smad3-siRNA由南京金丝瑞生物有限公司合成。

1.1.2仪器 iMarkTM酶标仪(美国Bio-Rad公司)；超净台(哈尔滨东联电子技术发展有限公司)；MCO175型CO2培养箱(日本Sanyo公司)；……