韩克光，申勇涛，原 恺，范 华，陈 静，金淑秀，古少鹏，田文霞，张 鼎，霍乃蕊*,常 泓

(1.山西农业大学动物科技学院，太谷 030801；2.山西农业大学实验中心，太谷 030801；3.山西农业大学生命科学院，太谷 030801)

受集约化养殖过程中饲养环境、饲养方式、糖皮质激素的应用以及饲料质量等问题的影响，骨质疏松(osteoporosis，OP)引起的动物健康和动物福利问题广受关注[1-3]。OP是一种常见的骨代谢疾病，以骨脆性增加、骨量减少、微观结构退化、高骨转换、破骨细胞(osteoclasts,OC)形成和骨吸收活性异常增加为特征[4-7]。OPG/RANK/RANKL系统是OC形成过程中的一个重要信号通路[8-10]，是骨骼生理研究领域的一个重大进展[8]。该系统包括核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB, RANK)，核因子κB受体活化因子配体(receptor activated nuclear factor kappa B ligand, RANKL) 和骨保护素(osteoprotegerin，orthopantomography, OPG)。多种因素通过OPG/RANK/RANKL系统引起骨量丢失，导致OP发生[11]，许多细胞因子也通过该系统发挥对骨代谢的调节作用[12]。鉴于其在OP发生机制中的重要作用，该信号系统成为治疗OP药物设计的新靶点[3]。

课题组前期研究结果表明以羊骨胶原肽(sheep bone collagen peptide,SBCP)和氯化钙为原料制备的钙螯合羊骨胶原多肽(SBCP-Ca)对去卵巢大鼠的骨质改善效果比雌激素更为安全和有效[13]，为进一步了解SBCP-Ca防治OP的作用机制，本研究建立OP动物模型，探讨SBCP-Ca对OPG/RANK/RANKL系统的影响，为骨破坏性疾病治疗药物的研发提供依据。

1 材料与方法

1.1 试剂及仪器

SBCP-Ca由本实验室以羊骨胶原肽和氯化钙为原料制备[14]。Trizol(Life公司)、反转录PCR试剂盒和SYBRTMPremix ExTaqTMⅡ为TaKaRa产品；大鼠血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen type Ⅰ N-terminal propeptide, PINP)和Ⅰ型胶原羧基端肽(C-terminal cross-linking telopeptide of type Ⅰ collagen, β-CTx)ELISA试剂盒购自Elabscience Biotechnology有限公司；原子吸收光谱仪(AA7020，北京东西分析仪器有限公司)；……