范 晴，谢芝勋，谢志勤，谢丽基，黄娇玲，张艳芳，曾婷婷，王 盛，罗思思，邓显文，刘加波

(广西兽医研究所，广西兽医生物技术重点实验室，南宁 530001)

口蹄疫(foot-and-mouth disease virus, FMDV)和水泡性口炎(vesicular stomatitis virus, VSV)是两种牛常见高度急性病毒传染病，一般呈暴发性流行，一旦暴发会给养牛业造成巨大的经济损失，被世界动物卫生组织(OIE)列为法定上报动物疫病[1-2]。FMDV和VSV引起的临床病状非常相似，难以区分，均表现为流涎，发烧，跛行，口腔、乳头和蹄部冠状带等处发生水泡及溃疡[3-5]。因此急需建立口蹄疫和水泡性口炎的快速鉴别检测技术，为我国FMDV和VSV的防控提供技术支持。

目前FMDV分为7个血清型：A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3、AsiaⅠ型，每个型又可以进一步分为不同的亚型。我国流行的是A、O和AsiaⅠ型。VSV分为新泽西型(NJ型)和印第安型(IND型)，在引起家畜发病的血清型中，NJ型占多数。在我国，VSV通常呈点状散发，一般不广泛流行[6]。

目前OIE推荐的检测FMDV和VSV的分子生物学方法主要是RT-PCR和荧光RT-PCR方法[7-8]。但RT-PCR和荧光RT-PCR都有一些自身的局限性，如RT-PCR敏感性较低，荧光RT-PCR成本较高，需要昂贵的仪器设备等。环介导的体外等温扩增检测技术(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)是在PCR方法上发展起来的新兴核酸检测技术，突破了恒温扩增的技术难点，6条引物同时扩增，敏感性高，特异性好，已在多种疾病的检测上得到应用[9-13]。目前国内虽然已有多位学者建立了多重LAMP检测方法，但这些方法都有一定的局限性，不能确定具体到底是哪一种病原所引起的阳性结果，不是真正意义上的鉴别诊断。本研究首次在LAMP方法中引入了荧光基团，拟建立检测FMDV和VSV的二重荧光RT-LAMP方法，通过颜色观察同时鉴别检测FMDV和VSV。……