NOB1调控Wnt/ β-catenin信号通路影响膀胱癌细胞凋亡的实验研究
2018-06-07胡国森吴晓杰
胡国森,吴晓杰
(河南科技大学第二附属医院泌尿外科,河南洛阳 471000)
膀胱癌在中国泌尿生殖系统恶性肿瘤中的发病率排名第1,其发病率在世界范围内的全部恶性肿瘤中位居第7位,手术治疗、放化疗等是目前膀胱癌治疗的主要方法,随着人们对肿瘤发病机制的不断探索,靶向基因治疗肿瘤逐渐成为肿瘤治疗的重点[1-2]。酵母基因Noblp人类同源基因(nin ond bind protein,NOB1)与核糖体形成和溶酶体的合成有关,是一种与核糖体装配有关的蛋白,其在人体组织中表达水平不同,在肺组织、肝脏等中表达水平较高,而在结肠、肾脏等组织中表达水平较低[3]。近年来的研究显示,NOB1参与恶性肿瘤的发生,在肿瘤组织中表达上调,而人为的下调肿瘤细胞中NOB1表达后,胶质瘤、结肠癌等癌细胞的增殖能力降低,凋亡水平升高[4-5]。Wnt/β-catenin是Wnt多种信号通路中的经典信号通路,参与肿瘤的发展,与细胞的凋亡等有关,参与细胞内多种癌基因或者是抑癌基因生物学功能的作用过程[6-7]。本研究以膀胱癌细胞为研究对象,下调细胞中NOB1的表达,探讨NOB1在膀胱癌细胞凋亡中的作用及机制,以期为靶向NOB1治疗膀胱癌提供理论基础。
1 材料与方法
1.1材料膀胱癌BIU-87细胞购自于上海信裕生物科技有限公司;PrimeScript RT reagent Kit、SYBR Permix Ex TaqⅡ荧光定量PCR试剂盒购自于大连Takara;RNA simple总RNA提取试剂盒购自于北京天根;BCA Protein Assay Kit购自于碧云天;Annexin V 凋亡检测试剂盒(FITC/PI双染法)购自于上海生工;活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Cleaved Caspase-3)一抗、β-连环蛋白(β-catenin)一抗购自于美国Cell Signaling CST;细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)一抗购自于美国Abcam;……
