RapidHITTM200系统在法医学中的应用
2018-06-04田雨苗汤继明张庆霞胡玉龙王鹏飞薛卢艳
孙 帅 ,田雨苗 ,汤继明 ,张庆霞 ,胡玉龙 ,王鹏飞 ,薛卢艳 ,刘 力 ,唐 晖
(1.山西医科大学晋祠学院,山西 太原 030025;2.山西医科大学第一临床医学院,山西 太原 030001;3.阿克苏地区公安局,新疆 阿克苏 843000;4.北京市公安司法鉴定中心,北京 100192;5.鄂尔多斯市公安局禁毒支队,内蒙古 鄂尔多斯 017000;6.包头市土默特右旗公安局,内蒙古 包头 014100;7.浙江迪安鉴定科学研究院,浙江 杭州 310030)
近十年来,DNA自动化分析技术取得了显著进步[1-7]。应用微流控芯片技术研发的RapidHITTM200系统[8]集DNA提取、扩增、电泳和分析四大功能于一体,可实现样品检测自动化,减少人为操作,降低产生污染的风险,且大幅缩短了检验时间,全部检验可在2h内完成。鉴于该平台目前在法医物证学实验室尚未大规模使用,本研究主要探讨该系统对法医学四类常见检材的检测效能以及两次重复检测运行中模板、模板DNA和PCR产物的再利用效能,以期为同行提供参考。
1 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂
RapidHITTM200系统(美国IntegenX公司),Maxwell®16核酸提取仪(美国Promega公司),9700型PCR仪、3130xl基因分析仪(美国AB公司)。
DNA IQTMCasework Pro 试剂盒、PowerPlex®16 HS系统(美国Promega公司),GlobalFilerTMPCR扩增试剂盒(美国Thermo Fisher Scientific公司)。
1.2 检材及实验方法
选取7名志愿者,使用医用棉签进行口腔擦拭,依次标记为A1~A7。首先将A1~A7口腔拭子检材依序置入RapidHITTM200系统进行检测,运行结束后取出拭子检材再依序置入新的样品盒进行检测。
提取两次检测过程中产生的模板DNA、PCR产物进行检测,即模板DNA首次、再次检测和PCR产物首次、再次检测。其中,模板DNA首次、再次检测定义为:使用医用棉签擦拭RapidHITTM200系统首次和再次运行后微流控区的模板DNA(1 μL),进行PCR扩增和后续电泳检测;……
