淡水溺死大鼠肺组织与血清中IL-1α、IL-1β和IL-13 mRNA表达
2018-06-04姜美玲刘志杰梁新华
姜美玲 ,刘志杰 ,潘 静 ,路 健 ,梁新华
(1.吉林鸣正司法鉴定中心,吉林 吉林 132011;2.山西医科大学法医学院,山西 太原 030001;3.赤峰市林西县公安局,内蒙古 赤峰 025250)
溺水是世界三大意外死亡原因之一,在发达国家,每10万人中有0.6~1.2人死亡[1]。而水中尸体的死因判定是法医学者公认的难题之一,这是由于大部分溺死案件的特征性尸体检验所见很少,从而难以与自杀、意外、他杀及自然死亡区别[2]。有研究[3]表明,约88个应激相关炎症因子可能有助于溺死的诊断,其中包括白细胞介素(interleukin,IL)-1α、IL-1β、IL-13 等。 本研究利用上述炎症因子,并加入常见疾病心肌梗死作为对照,采用TaqMan探针法检测大鼠肺组织及血清中 IL-1α、IL-1β、IL-13 mRNA 的表达变化,进一步探究其作为溺死诊断指标的可行性。
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 实验动物分组
健康雄性SD大鼠18只,由山西医科大学动物中心提供,体质量150~200 g,随机分为溺死组、空白对照组和心肌梗死组,每组6只。
1.1.2 模型制作及检材提取
大鼠均笼养,室温保持在20~25℃。溺死组大鼠投入水桶中,让其自由游泳10 min左右适应水中温度,再将其头部按入水中至溺死后捞出[4]。空白对照组采用颈椎脱臼法处死。心肌梗死组应用异丙肾上腺素25 mg/kg·d-1腹膜下注射,连续注射5 d,建立大鼠心肌梗死模型[5],第6天颈椎脱臼法处死。
处死后各组大鼠均从右心室抽取静脉血2~4mL,置于4℃冰箱中冷却30min,之后以离心半径10cm,1 000 r/min,离心5 min,收集血清,置于-80℃冰箱中备用。取血后,剪取右肺下叶5g,置于-80℃冰箱中备用。剪取各组大鼠心肌,10%多聚甲醛溶液固定后,制成石蜡切片,行HE染色进行组织病理学观察。……
