吴绍凤，郑荣荣，司凤磊，刘宏博，郭文聪，李宁，侯琳

(1青岛大学基础医学院，山东青岛266021；2青岛大学附属医院)

乙型肝炎病毒(HBV)感染可引起急、慢性肝炎和重型肝炎，我国是HBV感染大国。目前临床上主要采用 α 干扰素 (IFN-α)和核苷类似物进行抗病毒治疗[1]，核苷类药物的耐药性和 IFN-α 的无应答一直是当前抗病毒治疗的局限所在。寻找干预 HBV 感染和复制的新靶点和新方法，最大限度的抑制 HBV 复制，对阻止乙肝进程及并发症的发生具有重要意义。绿茶的主要功能成分是茶多酚，以黄烷醇和黄酮醇为主。儿茶素是绿茶中黄酮类的主要成分，其中以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量最多[2]。研究[3]表明EGCG具有抗肿瘤细胞增殖、抗细胞氧化、诱导细胞凋亡、抗菌等作用，且具有神经保护作用。最新研究[4]发现，EGCG还具有抗病毒活性,如能抗流感病毒、HIV病毒、EB病毒、腺病毒等。EGCG在体外可抑制乙肝病毒复制[5]，但其具体作用机制却鲜有报道。2016年10月～2017年7月，我们以HepG2.2.15细胞为模型，观察了EGCG对HBV复制的体外抑制作用，并探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 细胞、EGCG、试剂及仪器 HepG2.2.15细胞系购自iCell生物公司。HepG2.2.15细胞给予含15%胎牛血清(Gibco公司)的MEM(Gibco公司)培养基，置于5%的CO2、37 ℃饱和湿度的培养箱中培养。EGCG(南通飞宇生物科技有限公司)，根据我们前期细胞毒性实验结果，80 μmol/L以下EGCG对HepG2.2.15细胞的细胞毒性较小，因此，我们选择40、80 μmol/L进行后续实验。

0.02%胰蛋白酶消化液(碧云天生物有限公司)；MTT试剂盒(索莱宝生物公司)；青链霉素混合液(碧云天生物有限公司)；反转录试剂盒(Takara公司)；……