张姗姗，张永盟，袁明，赵卫星，鲍永华，杨万才

(1新乡医学院基础医学院，河南新乡453003；2济宁医学院精准医学研究院)

近年来，结直肠癌的发病率逐年升高。人回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)的mRNA有三种转录本(transcript 1、2、3)，表达两种同工型蛋白，转录本1和3表达I型(isoform 1)蛋白，转录本2表达II型(isoform 2)蛋白。I型蛋白在肽链的N端较2型蛋白多49个氨基酸，因此，表达I型的基因又被称为IBABP-L[1]。早期研究[2]并未区分两种同工型蛋白，认为Ⅱ型FABP6高表达于结直肠癌组织中，与结肠癌的发生、发展有关。后续研究[1]证明在结直肠癌中显著高表达的是I型 FABP6蛋白，并非II型FABP6蛋白，Ⅰ型FABP6可通过调控NF-κB通路参与结直肠癌的发生、发展。Ⅱ型FABP6可调控FXR受体参与胆汁酸的转运、吸收和肝肠循环[3，4]。但Ⅱ型FABP6蛋白在结肠癌发生、发展中的具体作用机制目前并不清楚。我们观察了Ⅱ型人回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)对人结直肠癌细胞系HCT116增殖和迁移的影响，并对其作用机制进行了探讨。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 HCT116(中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所)；FABP6 transcript2 引物(上海生工生物工程有限公司合成)；DH-5α感受态(Takara公司)；pEGFP-N1载体；BCA 蛋白定量试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；CCK8试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；Transwell小室(Corning公司)；琼脂糖胶回收试剂盒(上海生工生物工程有限公司合成)；DNA提取试剂盒(Omega公司)；FABP6 抗体(Abcam 公司)；STAT3抗体、p-STAT3抗体、AKT抗体(Proteintech公司)；CyclinD1抗体(Abcam公司)；p-CyclinD1抗体(Abcam公司)E-cadherin抗体(Abcam公司)；N-cadherin抗体(Abcam公司)；GAPDH抗体(Abcam)；HRP标记山羊抗兔IgG、HRP标记山羊抗鼠IgG (上海碧云天生物技术有限公司)。

1.2 Ⅱ型FABP6过表达质粒pEGFP-FABP6构建 利用Primer 5软件设计能够……