魏中琴，张晓龙，杨圆圆，卢杨，林芳珍，张砚君

(中国医学科学院北京协和医学院血液病医院，天津300020)

化学疗法、放射疗法或两者联用是肿瘤治疗的传统方法，但治疗肿瘤的效果不佳。抗体治疗是一种新兴的肿瘤治疗方法，可有效提高治疗效果，且毒副作用小。但传统的单克隆抗体无法有效募集T细胞至肿瘤部位，从而影响治疗效果。随着分子生物学和基因工程的发展，一些能募集T细胞的双特异性抗体(BsAbs)的出现解决了这一问题[1]。目前已被美国FDA批准用于前B细胞急性淋巴母细胞白血病(B-ALL)的双特异性T细胞衔接子(BiTE)[2，3]是这一领域最有前景的BsAbs。但BsAbs半衰期很短，治疗时需长时间给药。Kipriyanov等首次设计了一种对CD3和CD19都具有两个结合位点的串联四价双特异性抗体(Tandab)，分子量为105 kDa(约为BiTE的两倍), 在体内不容易被肾脏清除；且在体内具有良好的稳定性。体内研究[4]表明，Tandab在静脉注入小鼠体内后的半衰期为18.4～22.9 h。我们观察了Tandab(CD3/CD19)与CD19+、CD3+血液病细胞结合力及其对外周血单个核细胞(PBMC)的CD19+血液病细胞杀伤力的影响。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 抗体、细胞、及试剂 Alexa Fluor 488标记的鼠源性抗His-tag单克隆抗体购自MBL公司；PE标记抗CD3单克隆抗体(HIT3a)及FITC标记抗CD19单克隆抗体(HIT19a)购自中国医学科学院血液学研究所科技公司。人B细胞淋巴瘤细胞系Raji、BJAB、Daudi(CD19+)，人急性T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat(CD3+)及人慢性髓系白血病细胞系K562(CD19-和CD3-双阴性)由本室保存；人胚肾293T细胞由中国医学科学院血液学研究所国家重点实验室程涛教授馈赠。载体pAYZ-CD3CD19由本室构建并保存；……