扭转原肠胚形成同系物1基因过表达对人胃腺癌细胞株BGC-823增殖的影响
2018-06-01袁静怡曾嘉丽帅春刘玥
袁静怡,曾嘉丽,帅春,刘玥,3
(1南方医科大学基础医学院,广州 510515;2 广东省妇幼保健院;3广东省生物芯片重点实验室)
胃癌是来源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤,发病率居于恶性肿瘤第五位[1],病死率居于癌症病死率第二位[2,3]。我国胃癌发病率居高不下[4]。目前临床尚无有效的胃癌治疗方法。扭转原肠胚形成同系物1(TWSG1,在非哺乳类脊椎动物中称为Tsg)是一种高度保守的分泌蛋白,最早发现于果蝇属中[5],其表达产物是分泌型的BMP绑定糖蛋白,参与多种疾病的调控[6]。研究[7]发现,TWSG1基因在胆管癌和肝癌组织细胞中的表达量比正常细胞明显升高。在人恶性间皮瘤中,TWSG1基因启动子区域CpG岛的异常甲基化可能促进肿瘤细胞生存能力,或当暴露于分化不利的条件时,将会导致肿瘤异质性[8]。Alexandra 等[9]研究发现,在结直肠癌中TWSG1可能是一个典型的癌症抑制基因。因此,可推测TWSG1在不同肿瘤的发生、发育、转移过程中的作用机制存在差异。而有关于TWSG1基因在胃腺癌发生、发展中的作用机制相关报道较少。2016年1月~2017年6月,我们构建TWSG1基因真核表达质粒,并用其转染人胃腺癌细胞株BGC-823,观察其对BGC-823细胞增殖的影响。现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 细胞、试剂与仪器 感受态大肠杆菌DH5α为本实验室制备,人胃腺癌BGC-823细胞和pTSB-CMV-MCS-SBP-3Flag-EGFP-F2A-PuroR质粒为南方医院中心实验室保存。BGC-823于RPMI-1640完全培养基中培养(内含10%灭活小牛血清+1%双抗(100 units/mL 青霉素和100 μg/mL链霉素)。细胞置于37 ℃,5% CO2的培养箱中培养,并进行常规更换培养液与传代操作。质粒小提试剂盒(天根生……
